一、电泳技术在鉴定玉米品种及纯度中的应用(论文文献综述)
施龙建[1](2020)在《玉米杂交种纯度鉴定SNP核心引物筛选及检测体系方案的研究》文中提出随着我国玉米行业的飞速发展,玉米种子的质量也愈发的受到重视。纯度是玉米种子质量重要的指标之一,尤其是杂交种中的自交株是影响田间产量的关键因素。随着生物技术的发展,分子检测技术正广泛应用于玉米纯度鉴定当中,但现有的纯度鉴定方案具有一定的局限性,在高效性以及便捷性方面存在进一步提高的空间。本研究结合了 SNP标记技术具有共显性、高稳定性、二态性的优势,以及KASP技术平台具有高通量、低成本、高自动化、少步骤的优点,用于种子纯度检测。本研究还对所选用的DNA快速提取法以及PCR体系进行了优化,使其能够更好地应用于种子纯度快速鉴定,推动本鉴定方案能够更加便捷有效的应用到纯度检测。本研究从384个SNP基础位点中筛选获得60个侯选位点,将这60个位点转化为KASP引物,其中95%的位点被成功转化。综合考虑位点双亲互补率、多态性、稳定性和分型效果等多项指标,最终确定20个位点作为玉米杂交种纯度鉴定的核心位点,能够有效鉴定99.7%的供试样品纯度。基于SNP标记兼容多平台的特点,建立高通量纯度检测方案。当已知样品信息时,可查询标准样品指纹库获得双亲互补位点;当样品信息未知时,可利用纯度核心位点快速建立样品指纹获得双亲互补位点。本研究使用KASP技术结合快速DNA提取法用于纯度快速鉴定方案,具有快捷、准确、高通量、低成本的特点。本研究为其他作物提供参考,有助于推动我国多种农作物种子检测水平统一发展,为政府监管提供了更多纯度鉴定方案的选择。
冯博[2](2017)在《适于玉米品种鉴定的InDel多重复合检测体系建立》文中研究指明我国是农业大国,尤为关注农业生产。玉米是重要的粮饲作物,玉米品种逐年增多,种植面积逐年增大。玉米品种的真实性及纯度鉴定工作尤为重要且工作量较大。随着近年来分子标记技术迅速发展,人们迫切希望将最新的研究成果应用到生产实践工作中去。为了将InDel标记与多重PCR技术同时应用到玉米品种测试中,本试验采用核心引物组合法在10对核心引物的基础上构建20重PCR组合,40重荧光标记毛细管电泳。第一部分:玉米InDel分子标记20重PCR检测体系的建立。为构建玉米多重PCR检测体系,提高分子标记检测效率,本试验借鉴多重PCR在动物及人类上的研究成果探索利用InDel标记构建玉米多重PCR组合。试验中利用10份代表性玉米材料对238对InDel引物进行单重PCR评估,共得到192对扩增效率高、稳定性好的引物。根据软件评估结果、扩增质量、产物范围、染色体均匀分布原则从192对引物中优选出30对综合表现较好的引物形成扩增产物范围在80200bp和200400 bp的三组核心引物组合,每套组合中有10对引物分布在不同染色体上。在核心引物组合的基础上综合考虑染色体分布、碱基片段范围、引物荧光颜色,逐一添加引物,最终形成两组玉米20重PCR体系,一组40重荧光标记毛细管电泳。为InDel标记在玉米品种纯度鉴定方面奠定了坚实的基础,也为今后玉米多重PCR体系的建立提供了试验思路。第二部分:特定玉米品种京科968的纯度鉴定。对于不同样品的真实性鉴定来说需要40对引物组合进行鉴定,但进行纯度鉴定则是针对某一具体品种,这时只需要几对多态性高的引物组合即可。所以在做纯度鉴定时可以从40对引物组合中继续挑选出最优的纯度鉴定组合。本试验以京科968为例,从40对引物组合中优中选优挑选了7对适于京科968的最优组合,这套组合稳定性高,对于不同质量的DNA均适用。相比于40对引物来说这7对引物起到了纯度鉴定的作用、提高试验效率、节省试验耗材及试剂。
李光宇[3](2016)在《种子的非线性化学振荡指纹图谱及模式识别方法研究》文中提出中国耕地面积广大,农民人口众多,是一个具有悠久农耕文明的国家。种植农作物是农民重要的生存手段与经济来源。对于一些需要每年周期性播种种植的农作物而言,种子质量的好坏与品种的优劣直接影响到作物从生长到收获的每一个重要环节,从而进一步影响到粮食产量与农民收入。因此,作物品种与种子质量问题是农民关注的热点问题。而如今种子市场作物品种繁多,种子质量良莠不齐,更有假种子新闻不时见于报道。因此,实现对种子品种快速、便捷、精确、可靠的鉴定对种子市场管理有着重要的现实意义。非线性化学振荡指纹图谱法是一种利用B-Z振荡反应体系与生物样品中复杂氧化还原性组分相互作用而产生特征性谱图的分析方法,能够在未完全掌握复杂生物样品成分的情况下间接的反映出生物样品的整体化学特征,从而实现对样品分析鉴定的目的。研究了10个不同品种大豆种子的非线性化学振荡指纹图谱,利用软件提取出较为独立的特征参数,并用主成分分析及聚类分析的模式识别方法对其进行了鉴定。结果表明,不同品种的大豆种子,其化学指纹图谱的特征参数差异较大,在聚类分析及主成分分析中均能被准确分离鉴定;而属同一品种下的不同批次的大豆种子,其图谱特征参数差异较小(最大相对标准差为3.3%),在聚类分析及主成分分析中均被成功归为一类。非线性化学指纹图谱技术是一种新型有效地鉴定大豆品种的分析方法。利用非线性化学振荡指纹图谱及模式识别的方法对不同品种的水稻种子进行了鉴定,同时对杂交水稻种、传统水稻种及杂交水稻的子代种进行了化学振荡指纹图谱鉴定,并对鉴定的反应温度、样品添加量、图谱重现性等进行了讨论。结果表明,不同品种的水稻种子,其化学振荡指纹图谱具有明显的特征性,且杂交水稻子代种子的图谱特征与初代种子的图谱有较大差异。在45 OC的反应条件下,振荡图谱的特征参数稳定性良好,绝大多数水稻品种的鉴定可以在15分钟内完成。利用非线性化学振荡指纹图谱技术对17个常见的玉米品种进行了分析鉴定,并探讨了不同生产批次的玉米种子之间的差异性。结果表明,利用非线性化学指纹图谱结合模式识别的方法能够很好的提取并呈现出各玉米种子的整体化学特征。树状聚类分析图与主成分分析图把大量的数据信息直接转化为易于观察的可视信息,提供了一种简单有效的分析方法。本文通过评估与研究非线性化学指纹图谱在大豆、水稻、玉米三种作物品种及种子真伪等方面的方法研究,建立了对种子品种的快速有效的鉴别新方法,充实了非线性化学振荡指纹图谱的应用与研究范围。
叶凯[4](2016)在《江苏稻麦品种真实性SSR标记鉴定研究》文中提出水稻和小麦是江苏最主要的粮食作物,选育和推广适合江苏种植的优良稻麦品种具有十分重要的意义。然而,由于缺乏简便高效的品种真实性鉴定方法,导致种业市场中经常发生优良品种被侵权套牌现象,新品种审定过程中违规更换参试品种的情况也时常发生,给粮食生产带来了安全风险,而且严重影响育种家的积极性和创造性,阻碍了品种创新。本研究利用最新的农业行业标准(NY/T-1433-2014)中推荐的48个SSR标记和本实验室前期开发的52个SSR标记,分别对江苏2014、2015年区试水稻品种和2015年水稻种子市场中抽检样品的真实性进行鉴定,同时也利用这些品种检验和评价两套SSR标记的鉴别能力。此外,本研究还利用103个小麦SSR标记对江苏2014、2015年小麦种子市场中的抽检样品进行了真实性鉴定。研究结果为查处种业市场和品种审定过程中的各种违规违法行为提供了重要依据,同时为进一步建立“江苏水稻品种真实性鉴定的SSR标记法地方标准”提供了参考。主要研究结论如下:1)利用两套标记中的总计93个SSR标记,对36个区试水稻品种两年参试种子的一致性进行对比鉴定,发现2个品种其年度间样品分别在15个和26个标记位点差异,说明这2个品种在参试过程中被违规更换了。对江苏水稻种子市场中的355个抽检样品进行真实性鉴定,共发现与标准品种间存在2个以上差异位点的样品数有112个,其中有一半存在农艺表型差异。存在3个以上差异位点数的粳稻品种中,以中熟中粳类品种占比最高,说明中熟中粳品种的假冒套牌问题最严重。结合农艺表型,发现与标准品种间具有3个以上差异位点数的样品,其在表型上也均与标准样品间存在差异,而具有2个差异位点的品种中只有约1/3的样品与标准样品在田间存在明显表型差异。2)发现单独使用行标中的48个标记和本实验室开发的52个标记,均不能完全区分2015年的市场抽检样品和区试品种中存在明显表型差异的品种,相反利用两套标记整合后的93个标记则可区分所有有表型差异的品种。对2015年的48个区试品种DNA指纹分析中,发现行标中的48个标记的多态性水平总体低于本实验开发的52个标记,整合后的93个标记可更好的区分48个区试品种。据此,本研究建议将整合后的93个标记用于今后江苏水稻品种的真实性鉴定,并建立地方标准。3)对2015年的48个区试品种间的遗传多样性进行分析,发现品种间的遗传相似系数变化在0.638~0.973之间,平均为0.778,表明供试品种间的遗传基础狭窄、亲缘关系较近。就不同生态类型粳稻品种而言,中熟中粳品种间的遗传相似性最低。4)利用103个SSR标记对2014、2015年江苏省小麦种子市场抽检样品的真实性进行鉴定。发现在2014年的156个抽检样品种中,与各自标准样品间存在2个和3个以上差异位点的样品数分别有18和45个,后者涉及的品种主要有华麦2号,淮麦系列和连麦系列等品种。在2015年200抽检样品中,与各自标准样品间存在2个和3个以上差异位点的样品数分别有15个和8个,明显少于2014年,说明种子市场抽检检查对净化种子市场已经收到了效果。5)利用两年抽检品种中的63个小麦标准样品,评价了95个SSR(不包括扩增不出条带的8个标记)标记多态性。发现18个标记的扩增特异性较差,主带不清晰。余下的77个标记在63个样品中共检测到178个等位基因,平均每个标记2.31个,变幅为1-4之间,有19个只检测到1个等位基因;77个标记的PIC值平均为0.317,大于0.5的有22个,占28.57%。这表明77个SSR标记在测试小麦品种群体中的多态性一般,可以用于小麦品种的DNA指纹鉴定。
林春晶,张春宝,董英山[5](2015)在《DNA分子标记在作物杂交种纯度鉴定中的应用》文中研究表明作物杂交种的纯度鉴定是实现植物新品种保护及种子商品化生产的关键技术环节,对农业生产的经济效益和社会效益具有重要影响。本文全面的归纳了近年来DNA分子标记技术在作物杂交种纯度鉴定中应用,并具体分析了RAPD、SSR、AFLP、SARP、In Del和SNP等分子标记技术在杂交种纯度鉴定中的特点,显示其在作物杂交种的纯度检测上的广阔应用前景。
吴秋华,张春娇,张宝顺[6](2014)在《玉米种子纯度鉴定技术概述》文中研究指明种子纯度对玉米的产量起着至关重要的作用,因此在农业生产中对种子纯度进行鉴定是必要的。本文就种子纯度检测中传统的鉴定方法和DNA分子标记鉴定方法的原理及其应用进行综述,并对每种方法的优缺点进行评价,同时对未来种子纯度鉴定的发展趋势进行展望。
郭奕生,何德银[7](2014)在《SSR分子标记在玉米品种真实性鉴定上的应用》文中认为跟田间种植鉴定相比,SSR分子标记鉴定品种真实性具有快速、准确、不受环境影响等特点,是打击套牌侵权、维护品种权人合法权益的有效途径。利用20对核心引物对玉米品种进行真实性鉴定,有9对核心引物扩增产物出现明显差异,11对核心引物扩增产物没差异,表明利用SSR分子标记鉴定玉米品种真实性是可行的。
刘子记,曹振木,杨衍[8](2013)在《应用分子标记技术检测作物杂交种纯度研究进展》文中认为随着作物基因组工程的快速发展,丰富的基因组序列为分子标记的开发和应用奠定了基础。分子标记技术可以弥补和克服杂交种纯度形态学及同工酶鉴定中的许多缺陷和难题,为作物杂交种纯度鉴定提供一种准确、可靠、快速、方便的方法。本文综述了几种常用分子标记技术的原理、优缺点及在作物杂交种纯度鉴定中的应用现状。
闫忠[9](2013)在《遂宁市主推玉米品种田间及DNA纯度鉴定》文中研究表明玉米是遂宁市主要粮食作物,其杂交种子质量问题是我市农业生产中的一大突出问题,直接影响着我市玉米产业发展。科学鉴定杂交玉米种子的纯度,对种子质量的快速评价俱有重要的意义。本研究主要利用SSR分子标记技术对遂宁市主推玉米杂交品种的纯度进行了研究,通过对杂交玉米品种的遗传多样进行分析,构建了一套实用、便捷鉴定玉米种子纯度的方法。主要研究结果如下:(1)根据已知研究结果,选用均匀分布在10条染色体长、短臂上的20对核心引物作为鉴定引物,能够用SSR分子标记技术对遂宁市杂交玉米品种纯度进行分子标记鉴定。(2)通过对比研究田间种植鉴定结果,确定利用SSR分子标记技术进行玉米杂交品种的纯度快速鉴定是准确、可信的。(3)分析了当前遂宁市玉米杂交种子纯度低于国标的原因,即:种子纯度鉴定技术相对滞后,种子质量监管不力,种子企业对种子质量控制力度有所降低,造成种子纯度达不到国家标准。(4)通过研究SSR分子标记实验的应用,促进SSR鉴定技术全面推广和应用到各级种子管理工作中,以加强玉米种子质量监管,促进玉米种子质量的提升。
吴则东[10](2013)在《甜菜栽培品种的DNA指纹图谱构建及遗传多样性分析》文中提出品种的真实性和纯度是种子检测最重要的指标之一,而研究快速、准确、简便的DNA分子标记技术鉴定甜菜种子和将来新品种授权均具有重要的意义。本研究首次利用SSR分子标记对我国生产上应用的甜菜品种进行指纹图谱的构建,同时对影响品种纯度和真实性鉴定的各种因素进行系统的分析,建立了一套快速、高效的品种纯度和真实性鉴定方法,使快速鉴定甜菜品种及不同实验室的交流成为可能。主要结果如下:1.建立了快速高效提取甜菜基因组DNA的方法。本研究使用甜菜干种子或者叶片经真空冷冻干燥机处理1-2天后的干粉为原料,使用96孔PCR板代替单个离心管,利用碱裂解法对两种样品进行DNA的提取,该方法无需使用液氮,提取上百份DNA仅需要20分钟,提取的DNA能够作为SSR-PCR的模板。2.筛选出29对可用于指纹图谱构建的SSR核心引物。利用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对101对甜菜SSR扩增产物进行检测,共找到29对带型清晰、重复性好、多态性高、易于识别的引物,每对引物平均扩增出2~11个等位基因。扩增的片段大小在90~500bp之间,这29对引物可以作为甜菜品种纯度和真实性鉴定的核心引物。3.建立了甜菜多重SSR-PCR扩增体系。在单一SSR~PCR的基础上,甜菜2~3重SSR-PCR的体系为:每增加1重SSR,仅仅增加相应引物的量以及减少相应去离子水的量,其余成分不变。甜菜4~5重SSR-PCR要在单一PCR的基础上增加0.5倍的DNTPs以及相应引物的量,同时根据个别引物扩增效率的不同,相应减少个别引物的用量,此体系对大多数4重和5重PCR有效。多重PCR扩增体系的检测效率是单引物PCR的2~5倍。4.有7对引物可单独进行品种鉴定,利用其中3对引物构建了46个甜菜品种的SSR指纹图谱。聚类分析结果表明,在遗传距离0.20处,所有的品种被分为一类,在遗传距离0.16处,46个品种被分为4个类群,聚类分析结果与材料的来源有很好的一致性,基本上是同一公司或者同一国别的品种聚在了一起,从分子水平上说明了甜菜品种之间的遗传基础狭窄。另外,有7对引物SB04、S7、S6、BVV45、SB13、S13和S8单独使用时能够鉴别不同的品种,利用其中的3对引物SB04、S6和S7构建的指纹图谱就能区别所有的品种。5.建立了一套快速鉴定甜菜品种纯度和真实性的方法。该方法使用96孔PCR板,利用碱裂解法提取干粉DNA;使用GV及λ DNA检测提取样品DNA的浓度和质量; PCR反应体系为10μL;PCR反应程序将循环中的变性和退火温度均改为15s,延伸为30s,35个循环;PCR产物的分离使用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳;最后使用快速银染法对电泳后的聚丙烯酰胺凝胶进行检测;同时我们将模板DNA、引物稀释到工作浓度后和DNTPs以及PCR Buffer一起放入到冰箱保鲜层中,使用时不需要融化,可直接吸取,3个月内均能正常使用。利用以上的方法最终确立了一套简单、快速、节约、污染小的甜菜品种真实性和纯度的鉴定体系,促进了该技术的大规模使用,利用优化后的程序,一个成熟的实验室操作人员只需一天就可以完成192份样品的检测。
二、电泳技术在鉴定玉米品种及纯度中的应用(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、电泳技术在鉴定玉米品种及纯度中的应用(论文提纲范文)
(1)玉米杂交种纯度鉴定SNP核心引物筛选及检测体系方案的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
符号说明 |
第一章 前言 |
1.1 研究背景 |
1.2 传统常规种子纯度鉴定方法 |
1.2.1 籽粒形态鉴定法 |
1.2.2 幼苗形态鉴定法 |
1.2.3 田间小区种植鉴定法 |
1.3 蛋白鉴定法 |
1.3.1 贮藏蛋白电泳鉴定法 |
1.3.2 同工酶电泳鉴定法 |
1.4 分子标记技术 |
1.4.1 RFLP标记 |
1.4.2 SSR标记 |
1.4.3 SNP标记 |
1.5 SNP标记检测方法的发展 |
1.6 研究目的与意义 |
第二章 玉米杂交种DNA提取方案及PCR体系优化 |
2.1 目的和意义 |
2.2 实验材料与方法 |
2.2.1 初始实验方案 |
2.2.2 改良后快提方案 |
2.2.3 PCR反应程序优化 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 快提法改良结果 |
2.3.2 体系优化结果 |
2.4 小结 |
第三章 玉米杂交种SNP标记核心引物的筛选 |
3.1 实验与材料 |
3.2 SNP纯度候选位点及引物设计 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 玉米基因组DNA的提取 |
3.3.2 PCR扩增 |
3.3.3 荧光数据读取 |
3.3.4 数据分析 |
3.3.5 数据库构建 |
3.3.6 实验仪器及耗材 |
3.4 结果与分析 |
3.4.1 纯度鉴定候选位点的筛选与测试 |
3.4.2 纯度核心位点的确定与分析 |
第四章 讨论与结论 |
4.1 核心位点组合的选择 |
4.2 DNA快速提取方案及体系优化 |
4.3 KASP检测平台的优势 |
4.4 兼容多平台的SNP位点的转化和应用 |
4.5 农作物品种纯度检测技术发展展望 |
4.6 结论 |
参考文献 |
攻读学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
(2)适于玉米品种鉴定的InDel多重复合检测体系建立(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
前言 |
第一篇 文献综述 |
第一章 玉米品种检测及鉴定的必要性 |
1.1 种子真实性鉴定 |
1.2 玉米品种纯度鉴定 |
第二章 分子标记的发展 |
2.1 SSR标记 |
2.2 SNP标记 |
2.3 InDel标记 |
第三章 多重PCR体系的研究进展 |
第二篇 研究内容 |
第一章 玉米InDel分子标记20重PCR检测体系的建立 |
1.1 材料与方法 |
1.2 试验结果 |
1.3 讨论 |
1.4 小结 |
第二章 特定品种京科968的纯度鉴定 |
2.1 材料与方法 |
2.2 试验结果 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
作者简介 |
致谢 |
(3)种子的非线性化学振荡指纹图谱及模式识别方法研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 种子非线性化学振荡指纹图谱的研究背景与意义 |
1.2 指纹图谱法在种子鉴定中的研究进展 |
1.2.1 近红外光谱法的研究进展 |
1.2.2 电泳图谱法的研究进展 |
1.2.3 DNA指纹图谱法的研究进展 |
1.2.4 模式识别技术在图谱法中的应用 |
1.3 非线性化学振荡指纹图谱的研究进展 |
1.3.1 非线性化学振荡反应的发现及其机理研究 |
1.3.3 非线性化学振荡指纹图谱的发展与应用 |
1.4 本论文的主要研究内容及意义 |
第2章 大豆种子的非线性化学振荡指纹图谱及模式识别方法研究 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 仪器、试剂和材料 |
2.2.2 样品预处理及实验操作 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 大豆非线性化学振荡指纹图谱的鉴定原理 |
2.3.2 大豆非线性化学振荡指纹图谱的特征参数 |
2.3.3 大豆样品添加量对化学振荡指纹图谱的影响 |
2.3.4 不同生产批次大豆间图谱的差异性 |
2.3.5 大豆种子的聚类分析 |
2.3.6 大豆种子的主成分分析 |
2.4 本章小结 |
第3章 水稻种子的非线性化学振荡指纹图谱及模式识别方法研究 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 样品、试剂及实验仪器 |
3.2.2 样品预处理及实验操作 |
3.3 实验结果与讨论 |
3.3.1 样品用量对水稻非线性化学振荡指纹图谱的影响 |
3.3.2 温度对水稻化学振荡指纹图谱的影响 |
3.3.3 水稻非线性化学振荡指纹图谱的重现性 |
3.3.4 水稻非线性化学振荡指纹图谱的特征多样性 |
3.3.5 杂交水稻的子代种子与初代种子的差异性 |
3.3.6 杂交水稻化学指纹图谱的主成分分析 |
3.3.7 杂交水稻化学指纹图谱的聚类分析 |
3.4 本章小结 |
第4章 玉米种子的非线性化学振荡指纹图谱及模式识别方法研究 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 样品、试剂及实验仪器 |
4.2.2 样品预处理及实验操作 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 样品添加量对化学振荡指纹图谱的影响 |
4.3.2 玉米种子化学振荡指纹图谱的重现性 |
4.3.3 玉米非线性化学振荡指纹图谱的特征多样性 |
4.3.4 玉米种子化学指纹图谱的主成分分析 |
4.3.5 玉米种子化学指纹图谱的聚类分析 |
4.4 本章小结 |
参考文献 |
已发表的期刊论文 |
致谢 |
(4)江苏稻麦品种真实性SSR标记鉴定研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 植物新品种鉴定及保护方法 |
1.1.1 植物新品种 |
1.1.2 植物新品种鉴定 |
1.1.2.1 DUS测试 |
1.1.2.2 生物化学标记 |
1.2 DNA分子标记检测方法 |
1.2.1 基于DNA杂交技术的分子标记 |
1.2.2 基于PCR技术的分子标记 |
1.2.2.1 琼脂糖凝胶电泳 |
1.2.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
1.2.2.3 毛细管电泳 |
1.2.3 单核苷酸多态性标记(Single Nucleotide Polymorphisms, SNP) |
1.2.3.1 基于微阵列的SNP标记 |
1.2.3.2 基于KASP技术的KASP标记 |
1.3 SSR标记技术在植物新品种鉴定和DNA指纹检测中的应用 |
1.3.1 SSR标记在植物品种鉴定中的应用 |
1.3.2 水稻SSR指纹图谱的构建 |
1.3.3 小麦SSR指纹图谱的构建 |
1.3.4 玉米SSR指纹图谱的构建 |
1.3.5 大豆SSR指纹图谱的构建 |
1.4 本研究的目的意义 |
第二章 材料与方法 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 水稻品种(系) |
2.1.2 小麦品种(系) |
2.1.3 分子标记 |
2.2 DNA提取 |
2.3 PCR及凝胶电泳 |
2.4 农艺性状考察 |
第三章 结果与分析 |
3.1 SSR标记子在江苏水稻品种(系)真实性鉴定中的作用 |
3.1.1 真实性比对中的SSR标记及赋值方式 |
3.1.2 2015年继续参试的区试品种真实性鉴定 |
3.1.3 江苏2015年水稻种子市场抽检样品真实性鉴定 |
3.1.4 抽检水稻样品田间农艺性状观测与SSR标记鉴定结果比较 |
3.1.5 两组SSR标记在抽检水稻样品中的鉴别力比较 |
3.2 江苏省水稻品种真实性鉴定SSR标记方法研究 |
3.3 48个区试中粳品系群体中的遗传多样性分析 |
3.4 SSR标记在江苏小麦品种真实性鉴定中的作用 |
3.5 小麦品种真实性鉴定的SSR标记多态性分析 |
第四章 讨论 |
4.1 SSR标记应用于作物品种真实性鉴定可明显提高种子市场的监管效率 |
4.2 品种真实性判别中的SSR标记差异位点数的确定 |
4.3 江苏稻麦品种真实性鉴定的适合标记筛选及地方检测标准的建立 |
4.4 SSR、KASP标记技术在主要农作物品种鉴定中的应用前景及问题 |
参考文献 |
附录 |
附录1:聚丙烯酰胺凝胶电泳基本操作步骤 |
附表1:国标NY/T 1433-2014“水稻真实性鉴定SSR标记法”中推荐的48个SSR标记 |
附表2: 本实验室前期针对江苏水稻品种特点开发的52个SSR标记 |
附表3: 小麦品种真实性鉴定中采用的103个SSR标记 |
附表4: 基于93个SSR标记指纹的46个粳稻品种的遗传相似系数 |
致谢 |
(5)DNA分子标记在作物杂交种纯度鉴定中的应用(论文提纲范文)
1 分子标记技术与应用 |
1.1 RAPD 技术 |
1.2 SSR 技术 |
1.3 AFLP 技术 |
1.4 SRAP 技术 |
1.5 In Del 技术 |
1.6 SNP 技术 |
2 分子标记技术应用的前景展望 |
作者贡献 |
(7)SSR分子标记在玉米品种真实性鉴定上的应用(论文提纲范文)
1材料与方法 |
1.1试验材料 |
1.2试验方法 |
1.2.1 DNA提取 |
1.2.2 PCR扩增 |
1.2.3电泳及银染 |
1.2.4结果判定 |
2结果与分析 |
2.1提取的DNA质量 |
2.2核心引物的选用 |
2.3 SSR分子标记检测结果 |
3结论与讨论 |
(9)遂宁市主推玉米品种田间及DNA纯度鉴定(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.0 研究背景及意义 |
1.0.1 研究背景 |
1.0.2 研究意义 |
1.1 国内外研究现状 |
1.1.1 常规鉴定方法 |
1.1.2 生化鉴定技术 |
1.1.3 DNA 分子标记鉴定技术 |
1.2 研究内容与方法 |
1.3 技术路线 |
第二章 材料与方法 |
2.1 田间鉴定 |
2.1.1 实验材料 |
2.1.2 实验方法 |
2.1.3 田间调查与统计 |
2.2 SSR 分子鉴定 |
2.2.1 试验材料 |
2.2.2 溶液配制 |
2.2.3 引物选择 |
2.2.4 实验方法 |
第三章 结果与分析 |
3.1 田间鉴定的结果 |
3.2 SSR 鉴定的结果 |
3.3 数据分析 |
3.3.1 田间种植鉴定与 SSR 鉴定方法的对比分析 |
3.3.2 实验结果分析 |
第四章 结论与讨论 |
4.1 结论 |
4.1.1 SSR 分子鉴定技术适用于基层种子管理部门开展纯度快速检测 |
4.1.2 遂宁市主推玉米品种的纯度状况不佳 |
4.2 讨论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(10)甜菜栽培品种的DNA指纹图谱构建及遗传多样性分析(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 综述 |
1.1 品种纯度和真实性鉴定的意义及现状 |
1.1.1 构建甜菜品种特征指纹图谱的意义 |
1.1.2 种子真实性和纯度鉴定的方法 |
1.2 应用 SSR 分子标记鉴定甜菜品种的真实性和纯度需要解决的问题 |
1.2.1 快速提取甜菜基因组 DNA 的研究 |
1.2.2 SSR-PCR 反应体系和程序的优化 |
1.2.3 甜菜多重 SSR-PCR 反应体系的优化以及产物检测方法的改进 |
1.2.4 甜菜 SSR 核心引物的筛选及指纹图谱的构建 |
1.3 本研究的目的意义和技术路线 |
第二章 不同方法快速提取甜菜干种子基因组 DNA 的研究 |
摘要 |
2.1 试验材料和方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验试剂 |
2.1.3 试验仪器 |
2.1.4 试验方法 |
2.2 结果和分析 |
2.2.1 不同碱裂解法提取 DNA 浓度与纯度的检测 |
2.2.2 SSR 结果分析 |
2.2.3 不同方法提取甜菜干种子 DNA 浓度及纯度的检测 |
2.2.4 不同方法提取甜菜干种子 DNA 的 SSR-PCR 检测结果 |
2.3 讨论 |
第三章 新型核酸染料在甜菜琼脂糖电泳中的应用 |
摘要 |
3.1 材料和试剂 |
3.1.1 实验材料 |
3.1.2 实验试剂 |
3.1.3 主要仪器 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 DNA 的提取 |
3.2.2 1% 琼脂糖制备 |
3.2.3 利用λ DNA 检测甜菜基因组 DNA 的浓度 |
3.2.4 利用 GV 对 PCR 产物进行检测 |
3.3 结果分析 |
3.3.1 不同染料检测结果 |
3.3.2 GV 对 PCR 产物检测的结果 |
3.4 讨论 |
第四章 甜菜 SSR 核心引物的筛选以及多重 PCR 体系的建立 |
摘要 |
4.1 实验材料和方法 |
4.1.1 实验材料 |
4.1.2 DNA 的提取 |
4.1.3 实验中使用的 SSR 引物 |
4.1.4 PCR 反应体系 |
4.1.5 PCR 扩增产物的电泳及检测 |
4.2 结果分析 |
4.2.1 甜菜 SSR 核心引物的筛选 |
4.2.2 能够构建多重 SSR-PCR 反应的引物 |
4.2.3 甜菜 2-3 重 SSR-PCR 扩增体系的建立 |
4.2.4 4 重和 5 重 SSR-PCR 反应体系 |
4.2.5 4 重和 5 重 SSR-PCR 反应体系的优化 |
4.3.讨论 |
第五章 46 份甜菜品种的 SSR 指纹图谱构建及遗传关系分析 |
摘要 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 供试材料 |
5.1.2 方法 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 DNA 提取结果及检测 |
5.2.2 SSR 引物的扩增 |
5.2.3 SSR 指纹图谱的构建 |
5.2.4 聚类分析 |
5.3 讨论 |
第六章 快速鉴定甜菜品种纯度和真实性的研究 |
摘要 |
6.1 鉴定体系的优化 |
6.1.1 DNA 提取方法的优化 |
6.1.2 DNA 检测方法的优化 |
6.1.3 PCR 反应体系和程序的优化 |
6.1.4 电泳检测方法的优化 |
6.2 结果与分析 |
6.2.1 两种快速提取甜菜基因组 DNA 的比对 |
6.2.2 PCR 反应体系和反应程序的优化 |
6.2.3 优化后的方法与原方法对比结果 |
6.2.4 PCR 反应体系和程序优化的比较 |
6.3 讨论 |
第七章 全文结论和创新点 |
7.1 全文结论 |
7.2 创新点 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
作者简历 |
在读期间发表的主要论文 |
在读期间发表的着作 |
四、电泳技术在鉴定玉米品种及纯度中的应用(论文参考文献)
- [1]玉米杂交种纯度鉴定SNP核心引物筛选及检测体系方案的研究[D]. 施龙建. 扬州大学, 2020(05)
- [2]适于玉米品种鉴定的InDel多重复合检测体系建立[D]. 冯博. 吉林农业大学, 2017(03)
- [3]种子的非线性化学振荡指纹图谱及模式识别方法研究[D]. 李光宇. 西南大学, 2016(02)
- [4]江苏稻麦品种真实性SSR标记鉴定研究[D]. 叶凯. 扬州大学, 2016(02)
- [5]DNA分子标记在作物杂交种纯度鉴定中的应用[J]. 林春晶,张春宝,董英山. 分子植物育种, 2015(03)
- [6]玉米种子纯度鉴定技术概述[J]. 吴秋华,张春娇,张宝顺. 种子世界, 2014(12)
- [7]SSR分子标记在玉米品种真实性鉴定上的应用[J]. 郭奕生,何德银. 广东农业科学, 2014(12)
- [8]应用分子标记技术检测作物杂交种纯度研究进展[J]. 刘子记,曹振木,杨衍. 种子, 2013(06)
- [9]遂宁市主推玉米品种田间及DNA纯度鉴定[D]. 闫忠. 中国农业科学院, 2013(02)
- [10]甜菜栽培品种的DNA指纹图谱构建及遗传多样性分析[D]. 吴则东. 中国农业科学院, 2013(01)