一、MMP-2,TIMP-2在胰腺癌组织的表达及临床意义（论文文献综述）
赵馨旭[1]（2021）在《Bit1在胃癌中的生物学功能及其影响胃癌进展机制初步探讨》文中研究指明背景:2018年《CA:A Cancer Journal for Clinicians》杂志报道的全球最新癌症数据显示:恶性肿瘤中,胃癌发生率列第5位,病死率列第3位。胃癌易发生远端转移。因此,寻求新的胃癌生物标志物,探究其潜在分子机制,对早期胃癌诊断、改善患者预后有重要意义。失巢凋亡效应分子Bit1在多种肿瘤中表达异常,可发挥抑癌或促癌两种相反的作用。已有研究通过免疫组化法初步显示:Bit1在正常胃组织中低表达,而在胃癌组织、非典型增生组织中表达增强,提示Bit1可能参与胃癌发生发展。但目前为止,尚无Bit1对胃癌细胞生物学功能影响及其在胃癌中具体机制的相关研究。目的:本课题旨在探究Bit1在胃癌组织中的表达及临床意义,首次阐明Bit1在胃癌中的生物学功能,初步探讨Bit1高表达胃癌中Bit1影响胃癌进展的潜在作用机制,为探索以Bit1为靶点的胃癌相关研究提供新思路。方法:1.通过Western blot、WES、RT-q PCR、组织芯片免疫组化法、生物信息学方法明确胃癌组织中Bit1的表达情况与临床意义。2.Western blot实验筛选内源性高表达Bit1的胃癌细胞系BGC-803;通过慢病毒转染BGC-803细胞,干预其内源性Bit1表达;通过细胞划痕、Transwell实验分析不同Bit1表达水平对胃癌细胞侵袭及迁移能力的影响;通过CCK-8细胞增殖实验分析沉默Bit1对胃癌细胞增殖能力的影响;TUNEL实验及流式细胞术分析不同Bit1表达水平对胃癌细胞凋亡的影响;透射电镜观察不同Bit1表达水平对胃癌细胞线粒体形态、结构的影响。阐明Bit1在胃癌细胞中的生物学功能。3.生物信息学分析结果提示,胃癌组织中高表达的Bit1可能与EMT存在一定关联。我们通过Western blot及细胞免疫荧光法检测不同Bit1表达水平对胃癌细胞增殖、凋亡相关分子及EMT标志蛋白表达的影响,探究Bit1是否通过作用EMT影响胃癌进展。4.生物信息学分析结果提示,胃癌组织中高表达的Bit1可能与MMPs及integrinβ1具有一定相关性。通过Western blot验证不同Bit1表达水平对胃癌细胞中MMP-2、MMP-9及integrinβ1表达的影响,提示Bit1高表达胃癌中Bit1可能通过调节MMPs的表达,促进ECM降解进而影响胃癌进程。结果:1.胃癌组织中Bit1表达水平及临床意义通过WES、Western blot、RT-q PCR检测原发性胃癌患者癌组织与对应癌旁组织中Bit1蛋白及m RNA表达水平,结果表明胃癌组织中Bit1蛋白及m RNA表达水平均显着高于其对应癌旁组织;组织芯片免疫组化结果表明Bit1在胃癌组织中表达与胃癌患者肿瘤病理分级、淋巴侵袭密切相关;生物信息学分析结果显示:PTRH2在胃癌中高表达,且PTRH2的表达水平与GC患者肿瘤分期、淋巴结转移、患者性别、幽门螺杆菌感染及TP53突变等具有相关性;STRING数据库分析发现PTRH2可能与CDH1、CDH2、VIM、TJP1、MMP2、MMP9、ITGB1、VEGFC、FIGF、KDR、FLT1、FLT4等基因存在一定关联;通过RStudio软件进行KEGG富集分析发现PTRH2与细胞外基质受体等相关通路呈负相关,与胆固醇代谢等通路呈正相关。2.不同Bit1表达水平对胃癌细胞生物学功能的影响Western blot筛选出Bit1高表达胃癌细胞系BGC-803,通过Bit1 sh RNA慢病毒转染BGC-803,下调其内源性Bit1表达。通过Western blot及细胞免疫荧光实验对慢病毒转染成功的5个靶点进行验证,选择对BGC-803细胞内源性Bit1表达有较好干预效果的靶点Bit1 sh RNA1、Bit1 sh RNA5,用于进一步分析不同Bit1表达水平对胃癌细胞生物学功能的影响。细胞划痕实验结果显示,与WT、Vector组比较,24 h及48 h Bit1 sh RNA1、Bit1 sh RNA5组细胞划痕愈合率均显着降低,表明Bit1下调能抑制胃癌细胞迁移能力（P<0.01）;Transwell实验结果显示,与WT、Vector组比较,Bit1 sh RNA1、Bit1 sh RNA5组小室上表面侵袭至下表面的细胞数量明显减少,即Bit1下调能明显抑制胃癌细胞侵袭能力;CCK-8实验检测72 h内WT、Vector、Bit1 sh RNA1、Bit1 sh RNA5组细胞活力,结果表明,Bit1下调可显着抑制胃癌细胞增殖能力;流式细胞术及TUNEL法检测不同Bit1表达水平对细胞凋亡的影响,下调胃癌细胞中Bit1表达水平可显着增加胃癌细胞晚期凋亡数量及总凋亡率,促进胃癌细胞凋亡;电镜结果显示:Bit1下调可导致胃癌细胞线粒体重度肿胀,嵴扩张、断裂等损伤。3.Bit1下调可抑制EMT进程从而阻碍胃癌进展STRING数据库分析发现PTRH2可能与CDH1、CDH2、VIM、TJP1等编码EMT标志蛋白的基因存在一定关联。Western blot、细胞免疫荧光实验结果表明,沉默Bit1可上调促凋亡蛋白Bax表达,而下调增殖相关蛋白PCNA、Ki67及抗凋亡蛋白Bcl-2表达;下调Bit1表达水平可增强E-cadherin、ZO-1蛋白表达,而抑制Vimentin、N-cadherin蛋白表达,提示沉默Bit1可能通过抑制EMT进程阻碍胃癌进展。4.Bit1可能通过影响整合素及MMPs表达进而抑制胃癌进展Western blot结果表明,沉默Bit1可使MMP-2、MMP-9、integrinβ1表达下调,进而阻碍胃癌进展。结论:1.Bit1在胃癌组织中高表达,Bit1表达水平与胃癌患者病理分级、淋巴侵袭密切相关。2.沉默Bit1可明显促进胃癌细胞凋亡,抑制其迁移、侵袭、增殖能力,并破坏胃癌细胞线粒体形态结构。3.下调Bit1可通过调控增殖、凋亡相关分子及阻碍EMT进程而抑制胃癌进展。4.下调胃癌细胞中Bit1表达水平可抑制MMP-2、MMP-9及integrinβ1表达,提示Bit1高表达胃癌中Bit1可能通过调节MMPs表达,促进ECM降解进而影响胃癌进程。
白清丽[2]（2021）在《AKT/mTOR/STAT3信号通路在稽留流产中的作用及机制研究》文中认为目的:通过检测病例组和对照组胚胎组织中AKT/mTOR/STAT3信号通路相关因子和滋养细胞侵袭能力相关因子MMPs与TIMPs的基因和蛋白表达水平,研究此信号通路与稽留流产的关系及其可能的作用机制。方法:在兰州市妇幼保健院和平凉市静宁县妇幼保健院收集2018年05月至2019年04月期间,确诊的稽留流产患者和同时期进行人工流产终止妊娠的正常早孕者的血清及胚胎组织建立标本库。本研究选取12名稽留流产者为病例组,12名人工流产者为对照组,两组研究者孕周相同、年龄相近,无其他疾病及不良嗜好。对两组胚胎组织进行研究分析:（1）光镜下观察12对研究对象绒毛组织的病理组织学的变化;（2）采用q RT-PCR检测AKT/mTOR/STAT3信号通路相关因子基因的相对表达水平以及滋养细胞侵袭能力相关因子基因的相对表达水平;（3）采用Wes全自动蛋白质表达定量分析系统检测两组绒毛组织中AKT/mTOR/STAT3信号通路中相关因子蛋白的表达水平以及滋养细胞侵袭能力相关因子蛋白的表达水平;（4）采用免疫组织化学法观察p-STAT3在绒毛及蜕膜组织中的分布并进行定量分析。结果:（1）组织病理观察:病例组绒毛组织结构明显紊乱,滋养层明显变薄变浅,绒毛管腔变细、极度狭窄甚至消失,细胞数量明显减少,绒毛间质不清晰。（2）AKT/mTOR/STAT3信号通路相关因子表达:病例组绒毛组织中AKT、mTOR和STAT3 m RNA表达水平与对照组比较均降低（P<0.05）;病例组绒毛组织中p-AKT、mTOR、p-mTOR、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平与对照组比较均降低（P<0.05）,p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR和p-STAT3/STAT3比值也均较对照组减小（P<0.05）。（3）p-STAT3定位及定量:在两组绒毛组织中的合体滋养细胞和细胞滋养细胞及蜕膜组织中均有不同程度地p-STAT3的阳性表达,其主要表达于细胞核中;p-STAT3蛋白在病例组的表达低于对照组（P<0.05）。（4）滋养细胞侵袭能力相关因子表达:病例组绒毛组织中MMP2和MMP9 m RNA的表达水平与对照组相比均降低（P<0.05）,TIMP2 m RNA表达水平与对照组相比则升高（P<0.05）;病例组绒毛组织中MMP2和MMP9蛋白表达水平与对照组相比均降低（P<0.05）,TIMP2蛋白表达水平较对照组升高（P<0.05）,MMP2/TIMP2和MMP9/TIMP3比值与对照组比较均减小（P<0.05）。结论:稽留流产绒毛膜组织中AKT/mTOR/STAT3信号通路表达下调,其下游转录因子MMP2/TIMP2和MMP9/TIMP3失衡,可能导致滋养细胞的侵袭能力降低,妊娠早期胚胎植入过浅,滋养细胞功能异常,影响胚胎的正常生长发育。AKT/mTOR/STAT3信号通路表达下调可能是稽留流产发生的重要机制之一。
赵志强[3]（2021）在《MMP28在胰腺癌中的表达及临床意义》文中进行了进一步梳理研究目的 在消化系统的肿瘤中,胰腺癌的恶性程度极高,随着人口老龄化的加速和生活方式的改变,其发病率逐年增加,加之早期很难被现有的影像学方法检测出来,多数患者确诊时病情已经严重恶化,这使后续的治疗更加困难,病死率持续攀升。MMP28作为基质金属蛋白酶家族的最新成员,可在生物体内广泛表达。由于MMP28的功能具有多样性,所以其不仅在人体正常的生理过程中发挥至关重要的作用,而且还通过多种方式促进肿瘤的发生和进展。本研究通过生物信息学分析和实验验证的方法探究了MMP28在胰腺癌中的表达情况及其与胰腺癌患者的临床相关性,同时分析了MMP28的表达水平对胰腺癌患者预后的影响,以期为胰腺癌患者的诊断和预后评估提供帮助。方法1生物信息学分析本研究中我们首先通过对TCGA数据库中胰腺癌相关的基因样本和临床数据进行了分析。探究了MMP28在肿瘤组织和非肿瘤组织中的表达情况,以确定其在肿瘤组织和非肿瘤组织中的表达是否存在差异。随后评估了临床变量和MMP28表达之间的关系。紧接着进行了生存分析,并通过COX回归分析预测了MMP28对胰腺癌患者预后的影响。最后进行信号通路富集分析,研究了MMP28表达水平之间的信号通路。2实验验证我们采用相关的细胞实验和免疫组化检测的方法验证了MMP28在胰腺癌细胞、59例胰腺癌组织及与其相对应癌旁组织中的表达情况,评估了MMP28的表达和患者临床变量之间的关系,并分析了MMP28的表达量和临床变量对胰腺癌患者预后的影响。结果1生物信息学分析结果差异分析的结果提示MMP28在胰腺癌组织中的表达水平明显高于正常胰腺组织,差异有统计学意义（p<0.05）。在评估MMP28表达量与胰腺癌患者的临床相关性的过程中,我们发现MMP28的表达与癌组织的分化程度显着相关（p<0.001）,而与其他临床变量无关,采用逻辑回归分析也得到了一致的结论。生存分析提示MMP28的表达水平越高,胰腺癌患者总体生存的时间越短,差异具有统计学意义（p<0.05）。COX回归分析显示MMP28的高表达是胰腺癌预后不良的潜在独立标志物,同时,患者年龄和淋巴结转移是胰腺癌患者总体生存的独立危险因素。GSEA显示MMP28高表达富集到碱基切除修复、紧密连接、糖鞘脂的生物合成-乳酸和新乳酸酯系列、磷酸戊糖途径、细胞色素P450对异种药物的代谢、蛋白酶体等信号通路。2实验验证结果RT-PCR、Western blot提示胰腺癌细胞中MMP28的表达水平明显高于正常细胞（p<0.05）。免疫组化分析的结果显示在59例胰腺癌组织中MMP28阳性表达的样本为36例,占癌组织总样本的61.02%;同样的,在与其对应的癌旁组织中,阳性表达的样本为17例,所占比例为28.81%,差异存在统计学意义（p<0.05）。临床相关性分析时我们发现MMP28的表达水平与肿瘤的分化程度显着相关（p=0.028）。生存分析显示MMP28高表达的胰腺癌患者总体生存时间较短（p=0.005）。COX回归分析结果提示影响胰腺癌患者预后的危险因素包括患者的性别、T分期和淋巴结转移等,且MMP28的高表达是胰腺癌预后不良的潜在独立标志物,这与之前的结果基本一致。结论 MMP28在胰腺癌中高表达,且其表达水平与胰腺癌患者的生存时间呈负相关,相对于MMP28低表达的患者,高表达组患者的预后更差。此外,MMP28高表达可能是胰腺癌预后不良的潜在独立标志物。
朱静[4]（2020）在《PRR11基因在卵巢癌中的生物学功能及其机制研究》文中进行了进一步梳理背景介绍卵巢癌是严重危害女性身心健康的生殖系统肿瘤之一,其发病率相比其他的妇科恶性肿瘤（如宫颈癌、子宫内膜癌）略低。据数据统计显示,全球每年新增卵巢癌发病人数超过52万人,仅在我国每年卵巢癌新增患病人数即超过13万人。并且卵巢癌还是全球范围内致死率较高的恶性肿瘤之一,是妇科肿瘤中致死率最高的肿瘤,近些年来,卵巢癌的发病率与死亡率仍呈不断上升趋势。卵巢癌恶性程度很高,在发病早期并无典型的临床症状,术前也不易鉴别肿瘤的恶性程度与组织类型,因而在确诊时已往往处于晚期,错失最佳的治疗时机。同时由于卵巢癌具有易扩散、易腹腔转移、易复发、耐药率高等特点,卵巢癌患者的总体预后极差,尤其是III-IV期患者,5年生存率仅有25%～30%左右。在过去的20年,基于肿瘤根治手术、肿瘤减灭术治疗、多项辅助药物联合化疗和放射治疗等技术在临床上的应用为患者带来了新的希望,然而,总体存活率仍然较低,且化疗产生的耐药性,亦给患者带来严重的毒、副作用。因此,针对卵巢癌的恶性转移、复发、耐药等分子机制的深入研究,探索早期检测筛选的方法和更有效的晚期治疗策略,仍是当前基础肿瘤学研究的热点。近年来,随着分子生物学的发展,已发现抑癌基因突变或失活（P53、BRCA、ARID1A）、癌基因的异常激活（Ras、Her2、c-fms）以及表观遗传学的改变（甲基化水平、组蛋白修饰）与卵巢癌的恶性临床表型,肿瘤细胞的远处转移以及复发等恶性生物学行为密切相关。富含脯氨酸蛋白（Proline-rich Protein 11,PRR11）基因是新近发现的一种候选癌基因,PRR11作用靶标范围极其广泛,包括膜蛋白受体、粘附分子,生长因子和转录因子等,在肿瘤发生及恶性进展中发挥着重要作用。PRR11对恶性肿瘤影响的研究最早始于肺癌,有报道显示PRR11参与调控肿瘤细胞周期进展。靶向敲低PRR11表达后可引起核糖核苷酸还原酶RRM1和RRM2表达下调,DNA合成速率降低,导致细胞周期阻滞于S期,进而促使细胞增殖能力显着降低。PRR11广泛地表达于消化道恶性肿瘤组织标本中,表达率由高到低依次为食管鳞癌,胃癌,十二指肠癌,结直肠癌,肝癌,是判断患者预后的重要指标。此外,PRR11还可通过调节胃癌、肝癌等多种恶性肿瘤上皮细胞的间质转型,促进肿瘤细胞的局部浸润和远处转移。然而,在国内外文献中,尚未发现PRR11在卵巢癌的表达以及在卵巢癌中的生物学功能的相关研究报道,为此,在本课题中,通过临床取材分别获得51例卵巢癌组织以及51例卵巢正常上皮细胞标本,在组织水平上,分析PRR11的表达与分布,并探讨其与患者临床病理参数之间的关系;此外,进一步在体外实验中对PRR11在卵巢癌发生发展中的作用及机制进行初步的探索,为卵巢癌临床治疗提供新思路和新靶点。第一部分PRR11在卵巢癌组织中的表达及其临床意义目的:本部分旨在探讨PRR11在卵巢癌临床样本中的表达及分布,并分析PRR11表达与卵巢癌临床病理参数的相关性,初步探讨PRR11在卵巢癌疾病进展中的意义。方法:1.分别采用Real-time PCR、蛋白免疫印迹检测临床收集的51例卵巢癌组织和51例正常卵巢上皮细胞中PRR11 m RNA与蛋白水平的变化;2.应用免疫组织化学法检测PRR11蛋白在卵巢癌组织中的表达及定位,根据PRR11蛋白表达强度分组,进一步分析其与患者临床特征（年龄、组织学分级、淋巴结转移、FIGO分期和组织学类型等）的相关性。3.使用Kmplotter分析PRR11表达与卵巢癌患者预后的相关性。结果:1.与正常的卵巢上皮细胞标本相比较,卵巢癌组织中PRR11在m RNA和蛋白水平呈高表达状态;2.在卵巢癌细胞中,PRR11蛋白主要定位于细胞浆中;临床病例资料分析发现PRR11表达高低与卵巢癌FIGO分期（P=0.026）、淋巴结转移（P=0.029）之间呈正相关,与患者年龄（P=0.649）、组织学分级（P=0.803）和组织学类型（P=0.869）无相关性。3.PRR11高表达卵巢癌患者的总生存期明显低于低表达组患者。结论:卵巢癌组织中高表达的PRR11水平与患者临床恶性表型（FIGO分期,淋巴结转移）呈正相关,高表达的PRR11卵巢癌患者具有较短的生存期,预后越差,PRR11可能作为一个不良预后指标,参与了卵巢癌的疾病进展。第二部分PRR11在卵巢癌细胞中的表达及对卵巢癌细胞增殖能力的影响目的:本部分旨在分析敲低或过表达PRR11基因后对卵巢癌细胞增殖能力的影响及可能机制。方法:1.采用蛋白免疫印迹法分别检测人正常卵巢上皮细胞I0SE80、人卵巢癌细胞系Caov3、SKOV3、OVCAR3和HO-8910中PRR11蛋白的表达。2.设计、合成靶向敲低PRR11的小干扰RNA,采用脂质体LipofectamineTMRNAIMAX转染入人卵巢癌HO-8910细胞中,分别采用Real-time PCR和蛋白免疫印迹法观察PRR11在m RNA和蛋白水平的干扰效率。3.体外构建PRR11过表达重组载体,采用脂质体LipofectamineTM 2000转染入人卵巢癌Caov3细胞中,分别采用Real-time PCR和蛋白免疫印迹观察PRR11 m RNA和蛋白水平的过表达效率。4.分别采用CCK-8、克隆形成实验分析敲低PRR11表达后对卵巢癌细胞HO-8910增殖及克隆形成能力的影响。5.分别采用CCK-8、克隆形成实验过表达PRR11基因后对卵巢癌Caov3细胞增殖及克隆形成能力的影响。6.蛋白免疫印迹法检测沉默或过表达PRR11对细胞增殖相关基因c-myc、细胞周期蛋白cyclin D1表达的影响。结果:1.与人正常卵巢上皮细胞I0SE80相比,PRR11在四种卵巢癌细胞中均呈高表达趋势;其中,PRR11蛋白表达水平在Caov3细胞系中最低,在HO-8910细胞系中最高。2.RNAi敲低PRR11基因表达后,显着抑制HO-8910细胞的增殖及克隆形成能力。3.过表达PRR11基因可显着促进Caov3细胞增殖及克隆形成能力。4.RNAi沉默PRR11基因表达后,HO-8910细胞中增殖相关基因c-myc、细胞周期蛋白cyclin D1蛋白表达明显降低。5.过表达PRR11基因后,Caov3细胞中增殖相关基因c-myc、细胞周期蛋白cyclin D1蛋白表达明显增加。结论:PRR11在卵巢癌细胞中呈高表达趋势,PRR11可能通过正调控增殖相关蛋白c-myc、cyclin D1表达促进卵巢癌细胞的恶性增殖。第三部分PRR11对卵巢癌细胞侵袭及迁移能力的影响目的:本部分旨在探讨敲低或过表达PRR11基因对卵巢癌细胞侵袭及迁移能力的影响及可能机制。方法:1.分别采用Transwell侵袭与迁移实验分析敲低PRR11表达后对卵巢癌细胞HO-8910侵袭与迁移能力的影响。2.分别采用Transwell侵袭与迁移实验分析过表达PRR11基因后,对卵巢癌Caov3细胞侵袭与迁移能力的影响。3.蛋白免疫印迹法检测敲低或过表达PRR11基因,对金属基质蛋白酶MMP-2、金属基质蛋白酶抑制剂TIMP-2表达的影响。结果:1.RNAi敲低PRR11基因表达后,HO-8910细胞的侵袭、迁移能力显着降低,金属基质蛋白酶MMP2表达明显下调、金属基质蛋白酶抑制剂TIMP-2表达升高。2.过表达PRR11基因后,Caov3细胞的侵袭、迁移能力显着增加,金属基质蛋白酶MMP2表达明显上调、金属基质蛋白酶抑制剂TIMP-2表达降低。结论:在卵巢癌中,高表达的PRR11可能通过调节MMP2/TIMP-2比率,促进卵巢癌细胞的侵袭迁移能力。第四部分PRR11调控卵巢癌细胞生物学行为的机制研究目的:本部分旨在分析PRR11调控卵巢癌细胞增殖、侵袭迁移能力变化的分子机制。方法:1.蛋白免疫印迹法检测沉默PRR11后,HO-8910细胞中Akt、p-Akt、细胞总β-catenin和细胞核内β-catenin表达水平变化。2.Caov3细胞转染PRR11过表达重组载体,并添加PI3K特异性抑制剂LY294002后,蛋白免疫印迹检测Caov3细胞中Akt、p-Akt、细胞总β-catenin和细胞核内β-catenin的表达变化,并分别采用CCK8法、克隆形成实验及Transwell实验检测Caov3细胞增殖、克隆形成及侵袭迁移能力的变化。结果:1.RNAi敲低PRR11基因表达后,HO-8910细胞中Akt活性明显降低,细胞总β-catenin和细胞核β-catenin表达明显减少。2.过表达PRR11基因后,Caov3细胞中Akt活性明显增加,细胞总β-catenin表达增加,β-catenin细胞核转入增加,细胞增殖、侵袭迁移能力明显增加;当加入抑制剂LY294002后,Akt活性明显降低,细胞总β-catenin表达减少,细胞核β-catenin转入减少,Caov3细胞增殖、侵袭迁移能力受到抑制。结论:在卵巢癌中高表达的PRR11可能通过激活PI3K/Akt信号,促进β-catenin核转位继而调控肿瘤细胞的恶性增殖、侵袭迁移能力。
周彤[5]（2020）在《苦参碱在胰腺癌神经浸润中的作用及机制探讨》文中研究指明目的:本论文旨在探讨苦参碱对胰腺癌神经浸润的作用及其可能的作用机制,寻找抑制胰腺癌周围神经浸润的新方法,为提高胰腺癌患者手术切除率及预后提供可能的有效治疗途径。方法:1.利用网络药理学预测苦参和苦参碱调节神经浸润的潜在靶点;2.利用MTT实验探究苦参碱对胰腺癌SW1990细胞生长增殖的影响;通过Image Pro Plus 6.0软件测量苦参碱对DRG轴突生长的影响;3.通过Fluo-3 AM荧光探针法测定苦参碱和SW1990细胞培养基对DRG细胞[Ca2+]i的影响;4.利用Matrigel基质胶构建胰腺癌神经浸润体外模型,探究苦参碱对胰腺癌神经浸润体外模型的影响。观察并拍照记录6天内SW1990细胞的迁移以及DRG神经突的生长,计算神经侵袭指数与DRG生长指数;5.通过明胶酶谱法和ELISA法检测苦参碱和DRG对SW1990细胞MMP-2蛋白酶和细胞内IL-6、TNF-α蛋白表达的影响。结果:1.网络药理学预测得到苦参调控神经浸润的潜在靶点共38个,其中苦参碱调控神经浸润的潜在靶点分别为MMP-2、IL-6和TNF;2.在浓度不超过0.4mg/mL时,苦参碱对SW1990细胞的生长增殖无影响;3.浓度不超过0.4mg/mL的苦参碱对DRG神经突的生长无影响,对DRG细胞的[Ca2+]i也无影响;4.与空白对照组相比,SW1990细胞培养基使DRG细胞的[Ca2+]i显着升高,0.4mg/mL的苦参碱显着抑制了该条件下DRG细胞[Ca2+]i升高;成功构建胰腺癌神经浸润体外模型,模型中SW1990细胞与DRG神经突互惠生长。苦参碱对胰腺癌细胞的神经侵袭指数有显着的抑制作用,而对DRG生长指数无明显作用;5.明胶酶谱和ELISA实验结果表明,苦参碱使胰腺癌SW1990细胞MMP-2蛋白酶和细胞内IL-6蛋白的表达显着降低,而各组间TNF-α蛋白的表达量并无显着性差异。结论:本研究结果证明,在不影响胰腺癌SW1990细胞和DRG生长的条件下,低剂量苦参碱在体外培养体系中能抑制胰腺癌的神经浸润转移,其机制可能与MMP-2和IL-6蛋白的活性与表达有关,为胰腺癌的治疗及预后提供新的策略。
郭洪雷[6]（2020）在《Pirfenidone和Fraxinellone对实验小鼠慢性胰腺炎的疗效及分子机制研究》文中研究表明慢性胰腺炎（Chronic pancreatitis,CP）是由各种因素引起的一种胰腺组织慢性炎症-纤维化性疾病,其病理特征为腺泡萎缩、腺泡导管化生、炎细胞浸润、间质纤维化、胰管扩张/扭曲/狭窄和组织钙化。CP患者的主要临床表现为腹痛可伴腰背痛、脂肪泻、血糖升高和营养不良。小部分CP患者甚至可进展成胰腺癌,缩短了预期寿命。临床上治疗CP的主要手段为胰酶替代、体外震波碎石、内镜和外科手术。但是,尚无有效的药物可以逆转胰腺组织的慢性炎症及纤维化进程。因此,迫切需要研究CP的发病机制并寻找有效的治疗药物。胰腺纤维化是CP的重要病理特征之一。胰腺星状细胞（Pancreatic stellate cells,PSCs）在组织纤维化过程中发挥了关键作用。胰腺组织损伤所致的炎症反应激活了PSCs,PSCs活化后分泌大量的细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）,ECM沉积在组织间质内引起纤维化,最终导致了胰腺内外分泌功能的减退。此外,慢性炎症反应保证了PSCs的持续激活,加速了组织纤维化。巨噬细胞在慢性炎症反应中发挥了关键作用,不同功能类型的巨噬细胞均促进了CP的发展。吡非尼酮（Pirfenidone,PFD）是一种具有广谱抗纤维化作用的药物,已被FDA批准用于治疗特发性肺纤维化患者。梣酮（Fraxinellone,Frx）是从中草药中提取出来的一种多效性天然产物,具有抗炎、抑制肿瘤等作用。本研究将通过小鼠模型和体外细胞实验来探索PFD和Frx对CP的疗效及其分子作用机制,旨在为CP的临床药物治疗提供实验基础。本研究在C57BL/6雄性小鼠体内反复腹腔注射雨蛙素6周造CP模型,对照组小鼠体内反复腹腔注射生理盐水。治疗药物PFD或Frx从CP造模的第4周开始灌胃,持续约4周。每周监测各组小鼠的体重变化,可见单纯雨蛙素造模组小鼠的体重比对照组小鼠明显下降,而PFD或Frx治疗组小鼠的体重比单纯雨蛙素组小鼠显着增加,这说明PFD和Frx可以改善CP小鼠的体重变化,改善营养状况。小鼠处死后将胰腺组织进行石蜡包埋,切片进行H&E染色、Sirius red染色、Masson’s trichrome染色和IHC染色以评估CP的严重程度。单纯雨蛙素造模组小鼠的胰腺组织切片染色结果显示腺泡萎缩、炎细胞浸润、腺泡导管化生和纤维化形成,而对照组小鼠的胰腺切片染色结果显示正常的组织结构。PFD或Frx治疗组小鼠的胰腺切片染色结果显示组织损害程度明显减轻,CP病理学评分有所改善。此外,本研究提取了小鼠胰腺组织的RNA,进行RT-PCR和q PCR实验,分析了目的基因的转录表达情况。与对照组相比,单纯雨蛙素造模组小鼠胰腺组织内纤维化相关基因（αSMA、FN、Col1α1、TGFβ）和炎症相关基因（F4/80、CD68、TNFα、IL-6、CCL2）的转录表达明显增加,而PFD或Frx治疗可以减少纤维化和炎症相关基因的表达,这为体内实验PFD或Frx的疗效提供了一种解释机制。为进一步探索PFD和Frx的分子作用机制,本研究将进行大量体外实验,主要针对在CP发生发展过程中发挥关键作用的PSCs和巨噬细胞。首先分析PFD或Frx对PSCs活化及ECM合成的影响。本研究通过q PCR实验分析了PSCs活化marker（αSMA）及ECM（FN、Col1α1）的转录表达,并检测纤维化相关细胞因子CTGF和基质金属蛋白酶（MMP2/9）及其抑制剂（TIMP1/2）的转录表达。WB和IF实验分析了fibronectin、collagen和CTGF的蛋白表达。上述实验结果证明PFD和Frx能够抑制PSCs的激活和ECM的合成。为进一步解析PFD抑制PSCs活化的分子机制,本研究进行PSCs的转录组测序分析,找到了药物处理组和对照组之间的差异表达基因并推测出4条细胞信号转导通路与PFD的作用密切相关。随后通过q PCR、WB和IF实验分析了TGF-β/Smad信号通路、Wnt/β-catenin信号通路、JAK/STAT信号通路和Hippo信号通路中的关键组分的表达情况。实验结果显示PFD减少了转录因子Smad2/3的磷酸化,降低了LRP6和GSK3β的磷酸化水平,减少了activeβ-catenin的表达,并下调了靶基因CCND1、c-Myc和LEF1的表达。此外,PFD还能够减少转录因子STAT3的磷酸化,而对YAP的磷酸化无明显影响。上述结果证明PFD通过TGF-β/Smad、Wnt/β-catenin和JAK/STAT信号通路抑制了PSCs活化与ECM的合成。除了影响PSCs的激活,PFD还可以抑制PSCs的迁移,被细胞划痕实验和Transwell迁移实验所证实。此外,流式细胞实验结果还显示PFD可以增加PSCs的凋亡。对于Frx抑制PSCs活化的分子机制,本研究主要分析了MAPK和GSK3β/β-catenin信号通路。WB实验证明Frx可以降低p38 MAPK和GSK3β的磷酸化水平,减少activeβ-catenin及基因CCND1、c-Myc和LEF1的表达。因此推测Frx通过p38 MAPK/GSK3β/β-catenin信号通路抑制了PSCs活化与ECM的合成。巨噬细胞在胰腺慢性炎症中发挥着关键作用。本研究将进行体外实验分析PFD和Frx对巨噬细胞功能的影响。用LPS刺激巨噬细胞使其发生M1型极化,发挥促炎功能。用IL-4/IL-13刺激巨噬细胞使其发生M2型极化,发挥促纤维化功能。用PFD或Frx分别处理不同功能类型的巨噬细胞。由q PCR实验可知PFD下调了基因i NOS、TNFα和IL-1β的转录表达而没有影响基因CD206、CD301和Arg1。由WB实验可知PFD减少了CD86、i NOS、TNFα和IL-1β的蛋白表达而没有影响CD206、IL-4R、Arg1和TGFβ。此外,WB和IF实验结果显示PFD降低了STAT3的磷酸化水平而没有影响STAT1、IκBα和p65的磷酸化。因此说明PFD抑制巨噬细胞M1型极化,通过STAT3信号发挥抗炎功能,而没有影响巨噬细胞M2型极化。关于Frx对巨噬细胞功能的研究,首先进行了巨噬细胞的转录组测序分析,找到了药物处理组和对照组之间的差异表达基因,推测Frx既影响了巨噬细胞M1型极化,又影响了M2型极化。随后的q PCR和WB实验结果显示Frx下调了M1型、M2型极化相关的基因表达。WB结果还显示Frx可以抑制LPS刺激升高的IκBα和p65的磷酸化水平,而且可以抑制IL-4/IL-13刺激增加的IL-4R的表达。因此证明Frx通过NFκB信号通路抑制巨噬细胞的促炎功能,通过减少IL-4R抑制巨噬细胞的促纤维化功能。此外,用PSCs的上清液刺激巨噬细胞可使其发生M2型极化。q PCR结果显示Frx可以减少PSCs分泌趋化因子CCL2的表达,并下调了巨噬细胞分泌促纤维化因子TGFβ和PDGF的表达,而且可以拮抗PSCs上清液的作用。因此说明Frx还影响了PSCs与巨噬细胞之间的交互作用。综上所述,PFD和Frx可以缓解雨蛙素诱导的小鼠CP,抑制PSCs活化及ECM的合成,并减轻巨噬细胞的促炎促纤维化作用,有希望作为临床药物治疗CP。
李雪群[7]（2020）在《基质金属蛋白酶9及其抑制剂TIMP-1在胰腺癌中的表达及其临床意义的Meta分析》文中进行了进一步梳理目的:系统评价MMP-9及TIMP-1在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌发生进展等生物学行为的相关性。方法:以胰腺癌（pancreatic cancer）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、明胶B（gelatinase B）及TIMP-1为主题词及自由词在中国知网、万方、维普、百度学术、Pubmed、MEDLINE、SpringerLink、Embase数据库中检索自建库以来2020年2月所有公开发表的文献,按纳入和排除标准筛选文献。共纳入19篇文献,提取纳入文献中的相应数据,采用Review Manager 5.2软件进行荟萃分析,采用比值比（Odds ratio,OR）、95%置信区间（Confidence interval,CI）及P值分析。分析胰腺癌中MMP-9/TIMP-1的表达情况以及MMP-9/TIMP-1与性别、肿瘤大小、分化程度、浸润程度、TNM分期、淋巴转移、远处转移及血管侵犯等的关系。根据异质性大小选择固定效应模型或随机效应模型。并采用stata16进行发表偏倚分析。结果:共纳入文献19篇,其中16篇文献对比胰腺癌组织与正常组织MMP-9表达情况,结果显示胰腺癌组织MMP-9表达显着高于正常胰腺组织（P<0.00001）;15篇文献对比胰腺癌组织中MMP-9表达与性别的关系,结果显示,在胰腺癌组织中,MMP-9的表达与性别无明显相关性,差异无统计学意义（P=0.05）;MMP-9的表达与肿瘤大小（P<0.00001）、浸润程度（P=0.0003）、血管侵犯（P=0.0002）、TNM分期（P<0.00001）、淋巴转移（P<0.00001）、远处转移（P<0.00001）均呈正相关,与肿瘤分化程度呈负相关（P<0.00001）,差异均有统计学意义。MMP-9促进肿瘤的生长与转移,且MMP-9表达程度越高,其肿瘤分化程度越低,恶性度越高。TIMP-1在胰腺癌中也相应升高（P=0.008）,其与肿瘤的分化程度无明显相关性（P=0.15）,而与肿瘤的淋巴转移呈负相关（P=0.0001）,TIMP-1高表达,可减少肿瘤的淋巴转移。结论:MMP-9蛋白与肿瘤的发生呈正相关,促进肿瘤的发生及转移,在低分化及未分化的肿瘤中,MMP-9表达明显升高,且与TNM分期据有明显正相关性;而在胰腺癌组织中,MMP-9在男女性中的表达无差异。TIMP-1为MMP-9的抑制剂,可见,在胰腺癌患者中,TIMP-1同样高表达,而存在淋巴转移的患者中,TIMP-1的表达明显低于无淋巴转移者,说明TIMP-1高表达,抑制MMP-9蛋白的活性,可阻止肿瘤转移。
孟子琦[8]（2020）在《基于整合生物信息学的复方苦参注射液治疗三种常见肿瘤作用机制研究》文中提出研究背景在世界范围内,肝癌、胰腺癌、肺癌高居恶性肿瘤发病率和死亡率的前列,严重威胁着人们的生命健康,也给家庭和社会带来了沉重的负担。中药注射剂在肿瘤治疗中具有独特的优势,广泛应用于临床。但由于中药具有多成分、多途径、多靶点、多功能的特点,导致药效物质基础不明确、作用机制不清楚,增加了研究的难度,严重影响了国际化的进程。复方苦参注射液具有清热利湿,凉血解毒,散结止痛的作用,临床上广泛用于恶性肿瘤的治疗,然而其作用机制尚未完全阐明。近年来伴随着生物信息学的迅猛发展,新理念、新思路不断涌现,网络药理学与生物信息学的结合成为提高中医药研究水平的重要路径。基于此,本研究运用整合生物信息学方法,分析探究复方苦参注射液治疗肝癌、胰腺癌、肺癌的作用机制。研究目的通过生物信息学方法确认肝癌、胰腺癌中的关键基因。通过网络药理学方法预测、筛选复方苦参注射液治疗肝癌、胰腺癌、肺癌的化学成分、作用靶点和信号通路并进行网络构建,从系统层面揭示复方苦参注射液治疗肝癌、胰腺癌、肺癌的多成分、多靶点、多通路复杂机制。研究方法1.生物信息学分析在肝癌关键基因研究中,从GEO数据库下载基因芯片数据集,使用limma包进行差异表达分析,之后采用RobustRankAggreg包对数据集进行整合分析,筛选出共同被确认为差异表达的基因。通过STRING获取差异基因的蛋白互作信息,导入Cytoscape构建蛋白互作网络,并使用MCODE进行模块分析。通过DAVID进行GO和KEGG富集分析。利用KM plotter、GEPIA进行生存分析、表达水平分析和关联性分析。在胰腺癌关键基因研究中,从TCGA数据库下载转录组测序数据和患者的临床信息,利用WGCNA包构建共表达网络、识别基因模块并与临床信息相关联。通过Cytoscape对模块进行可视化,并使用CytoHubba确定关键基因。通过clusterProfiler包进行GO富集分析,并通过DAVID进行KGEE通路富集分析。采用survival包进行单因素Cox回归分析,随后根据单因素的P值筛选基因进行多因素Cox回归分析,构建生存相关的线性风险评估模型,通过Kaplan-Meier生存曲线评估高、低风险组样本的总体生存率差异情况。采用survivalROC包绘制ROC曲线,评价预后模型的预测准确性。2.网络药理学分析在复方苦参注射液治疗肝癌作用机制研究中,通过文献检索获得复方苦参注射液的化学成分,通过 STITCH、SuperPred、SwissTargetPrediction、TCMSP 获取化学成分的靶点。通过TTD、GEO、TCGA获得肝细胞癌相关基因。使用Cytoscape构建“化合物-潜在靶点网络”、“化合物-肝细胞癌靶点网络”、“药物-化合物-靶点-通路网络”,对网络的关键拓扑参数进行分析。通过DAVID进行GO和KEGG富集分析。使用KM plotter、GEPIA进行生存分析和关联性分析。利用AutoDock进行分子对接模拟。在复方苦参注射液治疗胰腺癌作用机制研究中,通过文献检索获得复方苦参注射液的化学成分,通过 STITCH、SuperPred、SwissTargetPrediction、TCMSP 获取化学成分的靶点。通过合并TTD、TCGA以及WGCNA筛选出的关键基因得到胰腺癌相关基因。随后通过STRING获取蛋白互作信息。使用Cytoscape构建“化合物-潜在靶点网络”、“化合物靶点-胰腺癌靶点蛋白互作网络”、“药物-化合物-蛋白互作靶点-通路网络”,并使用MCODE对网络进行模块分析。通过DAVID进行GO和KEGG富集分析。利用AutoDock+进行分子对接模拟。在复方苦参注射液治疗肺癌作用机制研究中,通过文献检索获得复方苦参注射液的化学成分,通过STITCH、SuperPred、SwissTargetPrediction获取化学成分的靶点,通过TTD、OMIM获得肺癌相关基因。随后通过STRING获取蛋白互作信息。使用Cytoscape构建“化合物-潜在靶点网络”、“肺癌靶点蛋白互作网络”、“化合物-肺癌靶点网络”、“药物-化合物-靶点-通路网络”,对网络的关键拓扑参数进行分析。通过DAVID进行GO和KEGG富集分析并通过systemsDock进行分子对接模拟。研究结果1.生物信息学分析结果对13个肝细胞癌基因芯片数据集进行整合分析,得到380个差异基因,包括293个下调基因和87个上调基因。通过蛋白互作网络与模块分析得到1 1个关键基因（CDK1、CCNB2、CDC20、CCNB1、TOP2A、CCNA2、MELK、PBK、TPX2、KIF20A、AURKA）和2个重要模块。富集分析表明,差异基因主要与代谢相关通路有关,关键基因和模块1与细胞周期密切相关。生存分析发现关键基因均与肝细胞癌患者生存时间呈负相关。表达水平分析表明关键基因均在肝细胞癌中高表达,关联性分析表明CDK1的表达与其他关键基因的表达呈正相关。对TCGA胰腺癌转录组测序数据进行筛选,共得到177个样本和5000个基因用于WGCNA分析,并得到11个基因模块。通过肿瘤分级、肿瘤分期和患者的生存状态最终筛选出黑色模块和蓝色模块作进一步研究。GO富集分析显示黑色模块与肿瘤的发生发展密切相关,蓝色模块与肿瘤的分化、侵袭和转移密切相关。KEGG通路富集分析显示,黑色模块中的基因主要富集在细胞周期、p53信号通路等通路上。蓝色模块中的基因主要富集在粘蛋白型O-聚糖的生物合成、花生四烯酸代谢、ECM-受体相互作用、紧密连接等通路上。通过网络分析,分别筛选出黑色模块和蓝色模块中的5个关键基因（NCAPG、BUB1、CDK1、TPX2、DLGAP5;INAVA、MST1R、TMPRSS4、TMEM92、SFN）,且这些基因均在胰腺癌中高表达。生存分析得到5个基因构建预后模型,其中TSPOAP1与胰腺癌患者生存时间呈正相关,ADGRG6、GPR87、FAM111B、MMP28与胰腺癌患者生存时间呈负相关。2.网络药理学分析结果在复方苦参注射液治疗肝癌作用机制研究中,通过网络分析,筛选出6个关键靶点（BCHE、SRD5A2、EPHX2、ADH1C、ADH1A、CDK1）,其中 CDK1 在肝细胞癌中高表达,其余5个均为低表达。GO富集分析显示,复方苦参注射液调控的与肝细胞癌有关的靶点主要富集在细胞周期、凋亡过程调控、代谢过程等生物过程中。KEGG通路富集分析表明,这些靶点主要与药物代谢-细胞色素P450、花生四烯酸代谢等通路有关。此外,关联性分析结果表明SRD5A2、EPHX2、ADH1C、ADH1A的表达与CDK1的表达有很强的负相关关系。生存分析结果表明,CDK1与肝细胞癌患者生存时间呈负相关,SRD5A2、EPHX2、ADH1C、ADH1A与肝细胞癌患者生存时间呈正相关。在复方苦参注射液治疗胰腺癌作用机制研究中,通过网络分析与模块分析,筛选出6个关键靶点（AKT1、MAPK1、MAPK3、EGFR、CDK1、JAK1）和3个重要模块。GO富集分析显示,3个重要模块主要与细胞周期、细胞增殖、JAK-STAT级联、MAPK级联、磷酸化,凋亡过程调控有关。KEGG通路富集分析表明,3个重要模块显着富集在细胞周期、ErbB信号通路、PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路等通路上。在复方苦参注射液治疗肺癌作用机制研究中,通过网络分析,筛选出8个关键靶点（CHRNA3、DRD2、PRKCA、CDK1、CDK2、CHRNA5、MMP1、MMP9）。GO 富集分析显示,复方苦参注射液调控的与肺癌有关的靶点显着富集在有丝分裂细胞周期G1/S转换、蛋白质磷酸化、ERK1和ERK2级联的调控、激酶活性等生物过程和分子功能中。KEGG通路富集分析表明,这些靶点主要参与癌症通路、癌症中的蛋白多糖、PI3K-Akt信号通路、非小细胞肺癌和小细胞肺癌等通路。研究结论本研究综合运用网络药理学和生物信息学方法,在系统层面揭示了复方苦参注射液治疗肝癌、胰腺癌、肺癌的化学成分、作用靶点和信号通路。初步阐释了复方苦参注射液治疗肝癌、胰腺癌、肺癌的作用机制可能与协同调控多个关键靶点和通路有关。本研究可为中药注射剂治疗不同类型恶性肿瘤的作用机制研究提供线索和思路,为进一步开展复方苦参注射液治疗肝癌、胰腺癌、肺癌的基础实验研究以及促进治疗肝癌、胰腺癌、肺癌中药的临床合理应用提供参考和借鉴。
陈瑾歆,莫琳,王含彦[9]（2019）在《基质金属蛋白酶及抑制剂在伴有神经周浸润的胰腺癌组织中的表达》文中进行了进一步梳理目的研究基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9和其抑制剂TIMP-2基因和蛋白在伴有神经浸润的胰腺癌组织中的特异表达。方法实验分为癌旁对照组、有神经周浸润的胰腺癌组,采用q PCR和Western印迹法检测各组MMP-2、MMP-9和TIMP-2基因和蛋白表达的变化。结果与癌旁对照组相比,有神经浸润的胰腺癌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2 mRNA的表达均显着增加,MMP-9和TIMP-2总蛋白的表达显着增加,MMP-2在癌旁组织和肿瘤组织中蛋白的表达无明显差异。结论 MMP-9和TIMP-2基因和蛋白在有神经周浸润的胰腺癌组织的表达显着增加。
陈一鸣[10]（2019）在《MT2-MMP在肾透明细胞癌中的表达及其在肿瘤增殖和侵袭中的作用机制研究》文中进行了进一步梳理肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）是泌尿系统恶性肿瘤中较为常见的恶性肿瘤,其中肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,cc RCC）是肾细胞癌中最常见的肿瘤类型。全球每年约有35000例新发肾细胞癌患者,而每年因肾细胞癌而造成死亡的患者约有14000人。由于早期肾细胞癌缺乏明显的症状和体征,肾细胞癌的诊断现在仍依赖于B超、CT和MRI等影像学资料,因此一部分患者在初诊肾细胞癌时已经存在有远处转移。针对转移性肾细胞癌,化疗及放疗敏感性均较差,而免疫治疗及分子靶向治疗对转移性肾细胞癌的预后有一定的改善作用,但仍然不够理想。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）是一类锌离子依赖的内肽酶家族,可通过破坏细胞外基质（extracellular matrix,ECM）从而促进恶性肿瘤的侵袭和转移。膜型基质金属蛋白酶-2（membrane type matrix metalloproteinase-2,MT2-MMP）最初是从人肺c DNA库中分离得到,其基因全长3530 bp,编码产生由669个氨基酸组成的蛋白。作为MMPs家族中的一员,其不仅具有对ECM的蛋白水解作用,同时还可参与细胞内外信号调节,激活其它MMPs共同参与细胞周围微环境的重构。研究发现,MT2-MMP在多种恶性肿瘤如胃癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、食管癌及乳腺癌中均呈高表达。但目前关于MT2-MMP在肾透明细胞癌中表达及作用的研究尚十分有限,缺乏对其作用具体机制的深入研究。本研究通过检测肾透明细胞癌组织标本及肾透明细胞癌细胞系中MT2-MMP的表达水平,分析其与肾透明细胞癌肿瘤分级分期及预后的相关性,进一步研究MT2-MMP与肾癌细胞侵袭、转移及细胞增殖之间的关系,并研究其可能相关的信号通路,探讨可能的作用机制,从而为肾透明细胞癌的诊断和治疗提供新的可能的标志物和靶点。第一部分MT2-MMP在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义目的:研究肾透明细胞癌组织中膜型基质金属蛋白酶-2（MT2-MMP）的表达及其与肾透明细胞癌临床特征以及预后的关系。方法:首先通过Meta分析MT2-MMP在恶性肿瘤中表达情况及其与预后的关系。而后通过q RT-PCR检测于我院进行手术的13例肾透明细胞癌患者肿瘤及癌旁组织中MT2-MMP表达情况,而后通过免疫组织化学方法,检测90例肾透明细胞癌组织切片中肾癌组织及癌旁组织中MT2-MMP及CD34的表达。比较肾癌组织与癌旁组织中MT2-MMP的表达差异,并通过χ2检验比较肾癌组织中MT2-MMP表达与肾癌分期、组织分化程度及患者年龄、性别的关系,采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验方法检验MT2-MMP表达与患者生存预后的相关性,应用单因素及多因素Cox模型分析不同肿瘤临床指标患者术后的死亡风险程度,Pearson线性相关分析MT2-MMP表达与微血管密度的相关性。结果:Meta分析表明MT2-MMP在多种在肿瘤中均呈高表达,且MT2-MMP表达情况与患者预后呈显着负相关（P<0.05）。MT2-MMP m RNA在肾癌组织中的表达高于癌旁组织,差异具有统计学意义（P<0.05）。免疫组化染色结果显示肾透明细胞癌肿瘤组织及癌旁组织中的MT2-MMP表达H-score分别为217.4±24.8及153.6±30.7,两者差异有统计学意义（P<0.05）。高MT2-MMP表达组与低MT2-MMP表达组患者其肾癌分期及组织分化程度存在差异,差异具有统计学意义（P<0.05）,不同MT2-MMP表达组患者年龄、性别及肿瘤位置无显着差异（P>0.05）。MT2-MMP都对患者术后总生存时间有显着影响,Cox单因素及多因素分析表明MT2-MMP H-score≥216.0是肾癌患者术后死亡的独立危险因素（P<0.05）,同时MT2-MMP表达与肿瘤微血管密度呈显着正相关（r=0.566,P<0.05）。结论:MT2-MMP在肾透明细胞癌的发生发展起到重要的作用,同时其可作为肾透明细胞癌患者预后风险预测指标,肾癌组织中MT2-MMP表达越高则其预后越差。第二部分MT2-MMP对于肾透明细胞癌生物学行为影响的研究目的:检测和比较不同肾癌细胞系中MT2-MMP的表达差异,并研究MT2-MMP对肾癌增殖侵袭的作用。方法:通过Western blot及实时定量逆转录-聚合酶链反应（q RT-PCR）方法检测人肾癌细胞系ACHN、786-O、OS-RC-2及人胚肾细胞系293T中MT2-MMP及MT1-MMP的表达水平并进行比较。构建MT2-MMP基因下调慢病毒载体并转染肾癌细胞系ACHN及786-O,采用细胞侵袭检测、CCK-8细胞增殖检测、流式细胞检测、细胞粘附试验等观察下调MT2-MMP表达水平下肿瘤细胞功能情况。同时将下调MT2-MMP表达的肾癌细胞及对照组细胞注射于裸鼠皮下,通过测量肿瘤大小及免疫组化染色观察下调MT2-MMP表达对肿瘤生长及微血管生成的影响。结果:MT2-MMP在人肾癌细胞系ACHN、786-O及OS-RC-2中的表达均显着高于其在人胚肾细胞系293T中的表达（P<0.05）。MT2-MMP与MT1-MMP在不同肾癌细胞系中表达存在差异但无显着相关性（P>0.05）。MT2-MMP表达下调的人肾癌细胞系ACHN及786-O其细胞侵袭、粘附及增殖能力受到显着地抑制（P<0.05）,动物实验表明下调MT2-MMP表达能显着抑制肿瘤细胞生长及肿瘤微血管生成（P<0.05）。结论:MT2-MMP在不同肾癌细胞系中均呈高表达,且不同肾癌细胞系中表达存在差异,其在肾癌细胞中的表达与MT1-MMP无显着相关性,降低MT2-MMP表达水平可抑制肾癌细胞的增殖及侵袭转移能力。第三部分表达谱基因芯片筛选稳定转染sh MT2-MMP基因的肾癌细胞中肿瘤增殖侵袭相关差异表达基因目的:应用表达谱基因芯片技术筛选稳定转染sh MT2-MMP基因的肾癌细胞系中与肿瘤增殖侵袭相关的差异表达基因。方法:提取稳定转染Lv-sh MT2-MMP基因的肾癌细胞系（ACHN及786-O）及稳定转染Lv-NC的对照组肾癌细胞系（ACHN及786-O）总RNA,通过基因芯片技术筛选差异表达基因,并对筛选出的差异表达基因利用q RT-PCR进行验证。结果:与对照组相比,MT2-MMP表达下调的肾癌细胞系共筛选出3368个共同差异表达基因,其中共同表达上调的基因1851个,共同表达下调的基因1517个,通过基因功能分析显示,这些差异表达基因涉及到细胞增殖、分化、细胞外基质组织、细胞粘附、免疫应答、细胞周期等,并关系到多条肿瘤相关信号通路。在全部差异表达基因中进一步筛选出5条与肿瘤相关的差异明显基因,q RT-PCR验证发现各基因变化趋势与基因芯片一致。结论:MT2-MMP可能可以通过影响多种与肿瘤增殖侵袭相关的基因进而促进肾透明细胞癌的增殖和侵袭。
二、MMP-2,TIMP-2在胰腺癌组织的表达及临床意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、MMP-2,TIMP-2在胰腺癌组织的表达及临床意义（论文提纲范文）
（1）Bit1在胃癌中的生物学功能及其影响胃癌进展机制初步探讨（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要英文缩略词表 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| 1.材料 |
| 1.1 样本 |
| 1.2 主要试剂与耗材 |
| 1.3 主要抗体 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2.方法 |
| 2.1 Western blot实验 |
| 2.2 全自动毛细管Western blot(WES) |
| 2.3 RT-qPCR |
| 2.4 组织芯片免疫组化法 |
| 2.5 生物信息学分析 |
| 2.6 细胞培养 |
| 2.7 慢病毒转染实验 |
| 2.8 细胞免疫荧光 |
| 2.9 细胞划痕实验 |
| 2.10 细胞侵袭实验 |
| 2.11 细胞增殖抑制实验(CCK-8法) |
| 2.12 TUNEL法检测细胞凋亡 |
| 2.13 流式细胞术检测细胞凋亡 |
| 2.14 细胞透射电镜实验 |
| 2.15 统计分析 |
| 三、结果 |
| 1.胃癌患者癌组织与其对应癌旁组织Bit1蛋白表达水平 |
| 2.胃癌患者癌组织及其对应癌旁组织Bit1mRNA表达水平 |
| 3.IHC法检分析组织芯片中90例胃癌组织及其对应癌旁组织中Bit1蛋白表达水平及临床意义 |
| 4.生物信息学分析 |
| 4.1 与PTRH2 相互关联的蛋白质互作网络图 |
| 4.2 PTRH2 在胃癌中高表达,且与肿瘤分期、淋巴结转移等相关 |
| 4.3 与PTRH2表达相关的信号通路富集情况 |
| 5.不同Bit1表达水平对胃癌细胞生物学功能的影响 |
| 5.1 不同胃癌细胞系中内源性Bit1表达情况 |
| 5.2 Bit1shRNA慢病毒转染胃癌细胞,沉默其内源性Bit1表达 |
| 5.3 下调Bit1表达水平可抑制胃癌细胞迁移及侵袭能力 |
| 5.4 下调Bit1表达水平可显着抑制胃癌细胞增殖能力 |
| 5.5 下调Bit1表达水平可显着促进胃癌细胞凋亡 |
| 5.6 沉默Bit1可损伤胃癌细胞线粒体形态结构 |
| 6.下调Bit1表达可能通过抑制EMT进程进而阻碍胃癌细胞转移 |
| 6.1 下调 Bit1表达可通过上调胃癌细胞Bax,下调 PCNA、Ki67、Bcl-2表达促进细胞凋亡、抑制细胞增殖 |
| 6.2 下调Bit1表达可抑制BGC-803细胞EMT进程 |
| 6.3 Bit1高表达胃癌中Bit1可能通过促进ECM降解进而影响胃癌进程 |
| 四、讨论 |
| 五、结论 |
| 六、参考文献 |
| 七、综述 胰腺癌细胞失巢凋亡相关抑制性分子研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）AKT/mTOR/STAT3信号通路在稽留流产中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 稽留流产概述 |
| 1.2 滋养细胞侵袭能力在胚胎发育中的作用 |
| 1.3 MMPs和 TIMPs在胚胎发育中的作用 |
| 1.4 AKT/m TOR信号通路 |
| 1.5 STAT3 信号通路 |
| 1.6 MMPs和 TIMPs与 AKT/m TOR/STAT3 信号通路的关系 |
| 1.7 研究目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验设计 |
| 2.1.1 研究对象和分组 |
| 2.1.2 技术路线图 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 主要试剂及仪器 |
| 2.2.2 主要溶液配制 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 绒毛组织HE染色病理切片制备 |
| 2.3.2 qRT-PCR检测步骤 |
| 2.3.3 Wes~(TM)全自动蛋白质表达定量分析系统检测步骤 |
| 2.3.4 免疫组化染色方法 |
| 2.4 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 一般临床资料分析 |
| 3.2 绒毛组织病理形态观察 |
| 3.3 绒毛组织AKT/m TOR信号通路相关因子的基因和蛋白表达水平 |
| 3.3.1 相关基因m RNA表达水平 |
| 3.3.2 相关蛋白表达水平 |
| 3.4 绒毛组织STAT3 信号通路相关因子的基因和蛋白表达水平 |
| 3.4.1 相关基因m RNA表达水平 |
| 3.4.2 相关蛋白表达水平 |
| 3.5 两组胚胎组织中p-STAT3 蛋白的表达定位 |
| 3.5.1 绒毛组织中表达定位 |
| 3.5.2 蜕膜组织中表达定位 |
| 3.6 绒毛组织MMPs、TIMPs基因和蛋白表达水平 |
| 3.6.1 基因m RNA表达水平 |
| 3.6.2 蛋白表达水平 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 绒毛组织结构病理形态改变分析 |
| 4.2 AKT/m TOR信号通路与稽留流产的关系 |
| 4.3 STAT3 信号通路与稽留流产的关系 |
| 4.4 基质金属蛋白酶及其抑制剂与稽留流产的关系 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 研究不足与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（3）MMP28在胰腺癌中的表达及临床意义（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 生物信息学分析相关软件 |
| 2.1.2 实验细胞 |
| 2.1.3 组织标本 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.1.5 主要试剂 |
| 2.1.6 常用试剂的配制 |
| 2.1.7 SDS-PAGE相关胶的配制 |
| 2.2 生物信息学研究方法 |
| 2.2.1 生物信息学分析 |
| 2.2.2 TCGA数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA) |
| 2.2.3 TCGA相关资源的获取 |
| 2.2.4 数据整理 |
| 2.2.5 差异表达分析 |
| 2.2.6 临床相关性分析 |
| 2.2.7 预后分析 |
| 2.2.8 信号通路富集分析 |
| 2.2.9 分析方法 |
| 2.3 实验验证方法 |
| 2.3.1 细胞培养 |
| 2.3.1.1 细胞复苏 |
| 2.3.1.2 细胞传代 |
| 2.3.1.3 细胞冻存 |
| 2.3.2 RT-PCR |
| 2.3.2.1 RNA提取和逆转录 |
| 2.3.2.2 荧光定量PCR |
| 2.3.3 蛋白质印记法(Western-blot) |
| 2.3.3.1 细胞总蛋白的提取 |
| 2.3.3.2 SDS-PAGE凝胶电泳 |
| 2.3.3.3 转膜 |
| 2.3.3.4 抗体结合 |
| 2.3.3.5 检测 |
| 2.3.4 免疫组化 |
| 2.3.4.1 脱蜡 |
| 2.3.4.2 水化 |
| 2.3.4.3 抗原修复 |
| 2.3.4.4 过氧化物酶阻断和血清封闭 |
| 2.3.4.5 孵育一抗 |
| 2.3.4.6 孵育二抗 |
| 2.3.4.7 显色和复染 |
| 2.3.4.8 脱水和封片 |
| 2.3.4.9 结果判定 |
| 2.4 统计学方法 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 生物信息学分析结果 |
| 3.1.1 数据下载和筛选 |
| 3.1.2 MMP28在胰腺正常组织和癌组织表达的差异性 |
| 3.1.3 MMP28表达量与胰腺癌患者的临床相关性 |
| 3.1.4 MMP28的表达与总体生存期 |
| 3.1.5 MMP28的表达与胰腺癌患者预后的关系 |
| 3.1.6 GSEA |
| 3.2 实验验证结果 |
| 3.2.1 RT-PCR检测结果 |
| 3.2.2 Western-blot检测结果 |
| 3.2.3 胰腺癌组织和其匹配的癌旁组织中MMP28表达的差异分析 |
| 3.2.4 MMP28表达量与胰腺癌患者临床相关性的分析 |
| 3.2.5 MMP28的表达与胰腺癌患者生存时间的关系 |
| 3.2.6 MMP28的表达与胰腺癌患者预后的关系 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词 |
| 综述 MMP28的特性及其在肿瘤发生发展中的作用 |
| 参考文献 |
| 在校期间的学术成果 |
| 致谢 |
（4）PRR11基因在卵巢癌中的生物学功能及其机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略语表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 PRR11在卵巢癌临床组织中的表达及其意义 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料和方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 第二部分 PRR11在卵巢癌细胞中的表达及对其卵巢癌细胞增殖能力的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三部分 PRR11对卵巢癌细胞侵袭及迁移能力的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四部分 PRR11促进卵巢癌细胞增殖和转移的分子机制研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 浆液性卵巢肿瘤的细胞起源 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 信号通路在卵巢癌中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况 |
| 致谢 |
（5）苦参碱在胰腺癌神经浸润中的作用及机制探讨（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 神经浸润的定义 |
| 1.2 神经浸润的临床意义 |
| 1.3 神经浸润的微环境 |
| 1.3.1 神经浸润的相关细胞 |
| 1.3.2 神经浸润的相关分子 |
| 1.4 苦参治疗癌症的研究 |
| 1.5 选题意义及研究内容 |
| 2 苦参有效成分与神经浸润的作用靶点分析 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 信息数据库 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 苦参化学成分的获取与活性成分的筛选 |
| 2.2.2 苦参活性成分靶点的获取 |
| 2.2.3 神经浸润相关的苦参靶点的筛选 |
| 2.2.4 成分-靶点网络图构建与分析 |
| 2.2.5 GO与 KEGG富集分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 苦参活性成分的筛选结果 |
| 2.3.2 神经浸润相关的苦参靶点 |
| 2.3.3 苦参成分-靶点网络图 |
| 2.3.4 靶点蛋白相互作用网络图 |
| 2.3.5 GO与 KEGG富集分析结果 |
| 2.4 讨论 |
| 3 苦参碱对胰腺癌神经浸润体外模型的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 实验细胞 |
| 3.1.3 实验药品及试剂 |
| 3.1.4 实验仪器及设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 胰腺癌细胞株培养 |
| 3.2.2 MTT法检测细胞的生长和增殖 |
| 3.2.3 基质胶内DRG培养及药物处理 |
| 3.2.4 DRG神经元细胞培养及[Ca~(2+)]_i测定 |
| 3.2.5 胰腺癌神经浸润体外模型建立及神经浸润分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 苦参碱对SW1990细胞生长的影响 |
| 3.3.2 苦参碱对DRG生长的影响 |
| 3.3.3 苦参碱对胰腺癌神经浸润的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 4 苦参碱抑制胰腺癌神经浸润的机制研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验动物 |
| 4.1.2 实验细胞 |
| 4.1.3 实验药品及试剂 |
| 4.1.4 实验仪器及设备 |
| 4.1.5 试剂的配制 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 酶联免疫分析(ELISA)法检测 |
| 4.2.2 明胶酶谱法检测 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 苦参碱对SW1990细胞中IL-6蛋白表达的影响 |
| 4.3.2 苦参碱对SW1990 细胞中TNF-α蛋白表达的影响 |
| 4.3.3 苦参碱对SW1990细胞MMP-2蛋白酶活性的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间专利申请授权情况 |
| 致谢 |
（6）Pirfenidone和Fraxinellone对实验小鼠慢性胰腺炎的疗效及分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 第一部分 Pirfenidone缓解雨蛙素诱导的小鼠慢性胰腺炎 |
| 一、实验结果 |
| 二、分析与讨论 |
| 三、结论 |
| 第二部分 Pirfenidone抑制胰腺星状细胞活化及其分子作用机制 |
| 一、实验结果 |
| 二、分析与讨论 |
| 三、结论 |
| 第三部分 Pirfenidone抑制巨噬细胞M1 极化及其分子作用机制 |
| 一、实验结果 |
| 二、分析与讨论 |
| 三、结论 |
| 第四部分 Fraxinellone缓解雨蛙素诱导的小鼠慢性胰腺炎 |
| 一、实验结果 |
| 二、分析与讨论 |
| 三、结论 |
| 第五部分 Fraxinellone抑制胰腺星状细胞活化及其分子作用机制 |
| 一、实验结果 |
| 二、分析与讨论 |
| 三、结论 |
| 第六部分 Fraxinellone调控巨噬细胞的功能及其分子作用机制 |
| 一、实验结果 |
| 二、分析与讨论 |
| 三、结论 |
| 参考文献 |
| 综述 慢性胰腺炎的试验性药物治疗进展 |
| 综述的参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文和参加科研工作情况说明 |
| 致谢 |
（7）基质金属蛋白酶9及其抑制剂TIMP-1在胰腺癌中的表达及其临床意义的Meta分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 研究指标 |
| 2.3 检索方法 |
| 2.4 文献评估 |
| 2.4.1 纳入标准 |
| 2.4.2 排除标准 |
| 2.4.3 文献质量评价 |
| 2.5 提取数据 |
| 2.6 数据分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 文献检索与评价 |
| 3.1.1 文献检索结果 |
| 3.1.2 文献评价 |
| 3.2 文献基本特征 |
| 3.3 数据整理 |
| 3.4 数据分析 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 第6章 论文的局限性 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（8）基于整合生物信息学的复方苦参注射液治疗三种常见肿瘤作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 复方苦参注射液抗肿瘤作用机制研究进展 |
| 综述二 复方苦参注射液临床应用进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 基于整合生物信息学的复方苦参注射液治疗三种常见肿瘤作用机制研究 |
| 一、基于生物信息学的肝癌关键基因研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 技术路线 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 二、基于网络药理学的复方苦参注射液治疗肝癌作用机制研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 技术路线 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 三、基于生物信息学的胰腺癌关键基因研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 技术路线 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 四、基于网络药理学的复方苦参注射液治疗胰腺癌作用机制研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 技术路线 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 五、基于网络药理学的复方苦参注射液治疗肺癌作用机制研究 |
| 1 资料与方法 |
| 2 技术路线 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 结语 |
| 1 研究成果 |
| 2 研究的创新与特色 |
| 3 研究的展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（9）基质金属蛋白酶及抑制剂在伴有神经周浸润的胰腺癌组织中的表达（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 分组 |
| 1.2.2 组织形态学观察 |
| 1.2.3 RT-qPCR |
| 1.2.4 Western印迹试验 |
| 1.2.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 有神经周浸润的胰腺癌组织的鉴定 |
| 2.2 q PCR检测癌旁对照组织和肿瘤组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2 mRNA的表达 |
| 2.3 免疫印迹检测癌旁对照组织和肿瘤组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2的表达 |
| 3 讨论 |
（10）MT2-MMP在肾透明细胞癌中的表达及其在肿瘤增殖和侵袭中的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 :MT2-MMP在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 :MT2-MMP对于肾透明细胞癌生物学行为影响的研究 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 :表达谱基因芯片筛选稳定转染sh MT2-MMP基因的肾癌细胞中肿瘤增殖侵袭相关差异表达基因 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 综述 基质金属蛋白酶与肿瘤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 |
| 致谢 |
四、MMP-2,TIMP-2在胰腺癌组织的表达及临床意义（论文参考文献）
- [1]Bit1在胃癌中的生物学功能及其影响胃癌进展机制初步探讨[D]. 赵馨旭. 湖北医药学院, 2021(02)
- [2]AKT/mTOR/STAT3信号通路在稽留流产中的作用及机制研究[D]. 白清丽. 兰州大学, 2021(09)
- [3]MMP28在胰腺癌中的表达及临床意义[D]. 赵志强. 兰州大学, 2021(12)
- [4]PRR11基因在卵巢癌中的生物学功能及其机制研究[D]. 朱静. 中国人民解放军陆军军医大学, 2020(07)
- [5]苦参碱在胰腺癌神经浸润中的作用及机制探讨[D]. 周彤. 大连理工大学, 2020(02)
- [6]Pirfenidone和Fraxinellone对实验小鼠慢性胰腺炎的疗效及分子机制研究[D]. 郭洪雷. 中国人民解放军海军军医大学, 2020(02)
- [7]基质金属蛋白酶9及其抑制剂TIMP-1在胰腺癌中的表达及其临床意义的Meta分析[D]. 李雪群. 南昌大学, 2020(08)
- [8]基于整合生物信息学的复方苦参注射液治疗三种常见肿瘤作用机制研究[D]. 孟子琦. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]基质金属蛋白酶及抑制剂在伴有神经周浸润的胰腺癌组织中的表达[J]. 陈瑾歆,莫琳,王含彦. 实用医药杂志, 2019(06)
- [10]MT2-MMP在肾透明细胞癌中的表达及其在肿瘤增殖和侵袭中的作用机制研究[D]. 陈一鸣. 苏州大学, 2019(06)