一、异种骨移植免疫学研究现状及进展（论文文献综述）
杨泽辉[1]（2014）在《冷冻干燥及高温煅烧制备去抗原异种骨支架材料的理化性能及生物相容性研究》文中指出目的：比较煅烧及冷冻干燥两种不同处理方法下去抗原异种松质骨支架材料的各项理化特性,初步评价冻干羊松质骨支架材料的生物相溶性。方法：将新鲜的绵羊脊椎松质骨切成5×5mm,去除软组织后放入甲醇/氯仿（3：1）中进行化学处理,将经过化学方法处理的羊松质骨放入马弗炉中,待其温度缓慢升到1000℃时在1000℃高温下煅烧2h制备成煅烧骨；将经过化学处理的羊松质骨放入-80℃冰箱中冷冻4周,然后在真空仪器中干燥制备成冻干骨,60Co照射消毒；将经过超纯水冲洗干净的羊松质骨当做对照组。分过观察三组组织学、测定孔隙率、能谱元素分析、衍射分析及力学测试研究煅烧骨及冻干骨材料的理化性能,经过MTT、热源实验、急性毒性实验、皮内刺激试验,初步评价冻干羊松质骨支架材料的生物性能。结果：支架材料均保留与人体骨组织类似的多孔三维结构,通过微观观察,它们的框架保存完整,有较小的孔隙（55-650u m）,和较高的孔隙率（65%-80%）,煅烧后的支架材料韧性降低而脆性明显增加,冷冻干燥处理后力学性能则下降不大,经过衍射分析它们的主要成分为羟基磷灰石,但煅烧组中还含有少量的β-磷酸三钙,经能谱分析它们钙磷含量比均接近人体的钙磷比。生物相容性的检测,冻干组支架材料没有细胞毒性,无急性毒性及热源反应,皮内刺激试验正常,化学组有细胞毒性及轻微急性毒性反应,有致热源作用及轻度刺激性。结论：冷冻干燥及高温煅烧制备支架材料理化性能基本达到骨组织工程支架材料要求,冷冻干燥制备支架材料具有良好生物相容性,达到了生物支架材料安全标准。
雷鹏飞[2]（2013）在《异种骨移植材料修复兔桡骨缺损的免疫学研究》文中进行了进一步梳理目的：观察胃蛋白酶脱蛋白异种骨移植材料修复兔桡骨缺损的免疫原性。方法：新西兰兔125只,随机分为空白组、胃蛋白酶组、白体骨组、骨基质组、过氧化氢组5组,每组25只,手术造成兔左前肢桡骨中上段10mm骨缺损,空白组骨缺损处不植入任何材料,其余各组分别在骨缺损处植入胃蛋白酶脱蛋白异种骨移植材料、自体骨、医用诱导骨基质、过氧化氢脱蛋白异种骨移植材料,术后3d、7d、14d、28d、56d每组分别处死5只动物,取相应标本行流式细胞仪检测、RT-PCR法、ELISA法和组织学观察。结果：术后流式细胞仪、RT-PCR及ELISA法检测结果示白体骨组及空白组各项指标均低于其他各组,胃蛋白酶组、骨基质组各项指标均低于过氧化氢组,胃蛋白酶组与骨基质组各项检测指标基本无显着统计学差异；组织学观察示自体骨组炎细胞及淋巴细胞较少,成骨良好,胃蛋白酶、骨基质组炎细胞及淋巴细胞较过氧化氢组少。结论：胃蛋白酶脱蛋白异种骨移植材料免疫原性优于过氧化氢脱蛋白异种骨移植材料,但稍差于自体骨。胃蛋白酶脱蛋白异种骨移植材料和医用诱导骨基质免疫原性无显着差异,初步达到了临床骨移植替代材料的要求。
杨楠[3]（2013）在《bFGF转染骨髓间充质干细胞附和支架材料的动物实验》文中研究说明目的：观察利用bFGF基因慢病毒载体转染羊BMSCs的组织工程骨、无转染的BMSCs组织工程骨、同种异体骨支架材料、β-TCP材料四组材料修复羊髂骨极限骨缺损的机制。方法：实验按材料分为4组， A组将bFGF基因重组慢病毒载体，转染羊BMSCs后加入同种异体骨支架材料（转染组），B组为无转染的BMSCs加载同种异体支架骨材料（无转染组），C组单纯同种异体骨支架材料，D组β-TCP材料，将4组材料回植羊双侧髂骨极限缺损模型，按4、8、12周3个时间点分组，每组3只，共9只动物，分别在三个时间点进行影像学、组织学观察，在12周末扫描电镜观察。结果：影像学结果显示：①4周末时，各组无明显差异（P>0.05）；②8周末开始转染组均明显优于其它组材料（P<0.05）；③无转染细胞组优于单纯支架材料组及β-TCP材料组；④同种异体骨支架材料与β-TCP材料间无明显差别。组织学结果显示：切片HE染色后，成骨情况A组优于B组优于C、D组。扫描电镜显示：细胞附着量A组>B组>C、D组。结论：证明基因转染后的组织工程骨修复极限骨缺损优于无转染的细胞支架材料及单纯支架材料与β-TCP材料；而无转染的细胞骨支架材料又优于单纯同种异体骨支架材料与β-TCP材料组；单纯骨支架材料与β-TCP材料间无明显差异性。
陈晨[4]（2012）在《复合同种异体骨修复长段骨缺损的实验研究》文中指出研究目的本实验通过研究兔桡骨大段骨缺损，以同种异体骨移植后，补充游离自体骨膜和血管内皮生长因子（VEGF），探讨外源性血管内皮生长因子（VEGF）和游离自体骨膜复合同种异体骨治疗兔桡骨大段骨缺损的疗效。研究方法取5只新西兰大白兔，雌雄不限，体重在2.5-3kg左右，经耳缘静脉空气栓塞致死，无菌条件下取出双侧尺桡骨,截去两段干骺端后得到长约40mm的骨段,将每段骨截成3段各长约12mm的骨段,除净软组织及骨髓，表面脱钙后-80°C深低温冷冻2周，备用，应用时予以解冻。另取60只新西兰大白兔，雌雄不限，体重在2.5-3kg，用速眠新注射液（0.15ml/kg）麻醉成功后，双上肢桡骨处脱毛、消毒、铺无菌单，手术显露双侧桡骨中段，制成1.2cm长的骨-骨膜缺损区，在骨缺损处放置备用同种异体骨，局部单独或联合应用血管内皮生长因子（VEGF）和游离自体骨膜，实验共分4组：1组（对照组）:同种异体骨；2组:同种异体骨+游离自体骨膜复合；3组:同种异体骨+VEGF复合；4组:同种异体骨+VEGF+游离自体骨膜复合。术后4周、8周、12周分别通过大体观察、X线观察、生物力学分析及HE染色组织学观察，将结果进行对比，进行统计学分析。结果1、大体观察：术后4、8、12周见1组骨缺损区骨痂组织生成量及生成速度均较2、3、4组差。4组骨缺损区骨痂组织多于1、2、3组。其中3组优于2、1组，术后4、8周4组骨痂生成量明显多于1、2、3组，骨痂生成速度明显快于1、2、3组，骨缺损区可见新骨生成。2、X线检查：术后X线显示1组在术后4周仅在骨缺损端有少量新骨形成，并有部分软组织填充，8周时仍呈骨不连征象，4周、8周4组骨痂量多于1、2、3组，3组优于1、2组，术后12周后四组实验动物骨缺损均达到骨性愈合，骨痂量明显多于骨缺损两端宿主骨，部分髓腔已通。X线摄片评分后统计分析得出：术后4周时，1组的X线下愈合程度评分均值最低，4组的X线下愈合程度评分均值较1、2、3组偏高，3组大于1、2组（p<0.05）；8周时，1组的X线下愈合程度评分均值最低，4组的评分仍较1、2、3组偏高，3组大于1、2组（p<0.05）；12周时，1组的X线下愈合程度评分均值最低，4组的愈合程度最好（p<0.05），2、3组次之（p>0.05）。3、组织学检查：术后4周和12周，1组的组织学评分最低（p<0.05），2、3组优于1组（p>0.05），4组形成的编织骨量明显多于,1、2、3组（p<0.05），；术后8周，1、2、3、4组的组织学愈合程度评分逐渐增大（p<0.05），4组的组织学愈合程度评分优于其他三组。4、生物力学测定：术后4周，三点弯曲最大应力测定：1组最差（p<0.05），2、3组优于1组（p>0.05），4组明显高于1、2、3组（p<0.05）；术后8周时，4、3、2、1组的三点弯曲应力逐渐增大（P<0.05），4组的三点弯曲最大应力仍然明显高于1、2、3组（p<0.05）；术后12周时，四组的三点弯曲应力已无明显差异（p>0.05）。结论1、VEGF和游离自体骨膜在骨缺损愈合过程中均发挥了重要的作用。2、骨缺损周围局部应用外源性VEGF、游离自体骨膜与同种异体骨复合，可明显促进骨缺损愈合，使骨痴量增加，但是两者复合应用效果要更明显，对临床治疗大段骨缺损有一定的意义。
李世光,潘乐[5]（2012）在《同种异体骨移植后T淋巴细胞的分布与变化》文中指出背景:研究表明体液免疫在同种异体骨移植免疫排斥反应中不起主要作用,目前一般认为细胞免疫在排斥反应中起主导作用。目的:概述同种异体骨移植后T淋巴细胞的分布与变化。方法:采用电子检索的方式,在万方数据库（http://www.wanfangdata.com.cn/）、Pubmed数据库（http://www.ncbi.nlm.nih.gov.pubmed/）中检索1990-01/2011-12关于同种异体骨移植后T淋巴细胞的分布与变化的文章,关键词为"骨移植,同种异体,T淋巴细胞"。排除重复研究、普通综述或Meta分析类文章,筛选纳入31篇文献进行评价。结果与结论:同种异体骨移植后,体内抑制T淋巴细胞被激活,对免疫排斥反应起负反馈调节作用,T淋巴细胞发生显着变化;但深低温冷冻、冷冻干燥、γ射线辐照、复合免疫抑制剂等方法可以有效降低其免疫原性及疾病传播的风险。大量研究认为,同种异体骨具有骨组织的完整性结构、机械稳定性、生物学活性、骨诱导能力和极低的免疫性以及与宿主骨有较强的愈合能力等优点,植入体内后通过全方位再血管化、新骨形成、异体骨与宿主骨连接而实现生物学骨掺入过程。提示同种异体骨是一种可行的移植材料,可作为目前修复骨缺损的重要手段之一。
王昊,柏树令[6]（2011）在《脱细胞骨基质的立体构筑及TritonX-100残留量测定》文中进行了进一步梳理目的制备骨组织工程的新型天然支架材料。方法取兔双侧胫骨,修整成片状,使用含3%TritonX-100及蛋白酶抑制剂的Tris-HCL的缓冲液洗脱掉骨片中的细胞成份。取脱钙后骨片行HE染色及阿利新蓝染色并用免疫组化方法检测骨片中纤维连接蛋白及层黏连蛋白;Mallory-Heidenhain染色测量骨陷窝形态;对骨片进行扫描电镜及透射电镜观察;使用反相高效液相色谱检测TritonX-100残留量。结果 HE、阿利新蓝染色见脱细胞骨基质胶原纤维排列规则,骨陷窝空虚;骨陷窝形态测量表明脱细胞骨基质的骨陷窝数量与正常骨的骨陷窝数量没有差异;免疫组织化学染色及免疫透射电镜均见纤维连接蛋白与层黏连蛋白存在于脱细胞骨基质和正常骨的骨陷窝周边处;TritonX-100残留量测定表明脱细胞骨基质最低检出极限为0.5μL/mL。结论脱细胞骨基质保持了骨的正常立体构筑,是一种新型的生物衍生材料,具有广阔的应用前景。
易灿[7]（2011）在《计算机辅助临床大段骨缺损的精确修复》文中研究说明目的1.研究运用计算机辅助设计精确修复临床大段骨缺损的方法,并对其修复效果进行临床观察和疗效评价,探讨计算机辅助手术的方法在临床大段骨缺损治疗中的应用价值。2.运用三维有限元分析方法,研究在异体骨上用电钻钻孔对异体骨抗压强度的影响,探讨在不会明显影响异体骨的抗压强度的情况下,钻孔的最佳孔径和孔间距的临界值,为临床在异体骨上尽可能多的钻孔植入自体骨促进新骨生长提供理论依据。方法1.回顾性研究应用计算机辅助手术技术对临床大段骨缺损进行精确修复的患者26例,按反求工程的基本原理,采用医学CT/MRI扫描获取患者病变部位二维数据,术前计算机辅助模拟临床大段骨缺损的精确修复过程：包括病变部位的三维重建、个性化分析骨缺损、CAD设计辅助手术模板、CAD设计个性化假体、计算机模拟骨缺损修复重建。术中按照计算机辅助设计方案精确实施手术,采用外形匹配的“异体骨+合适内固定器或异体骨+个性化人工关节置换”来修复大段骨缺损,并对患者进行术后临床观察、影像学评价及功能评价。2.采用Mimics软件测量正常成人股骨中段骨管参数,运用solidworks软件模拟股骨中段设计并建立骨管、骨板的三维模型,按照设计呈等级的孔径、孔间距参数在骨管、骨板三维模型上模拟钻孔,然后运用三维有限元分析钻孔对骨管、骨板模型抗压强度的影响,并对钻孔的孔径、孔间距的安全临界值做出评价。结果1.所有患者均顺利完成手术,术前患者骨缺损长度为30-207mm,平均93.7mm,术中植骨长度30-207mm,平均95.5m-m；所有患者均获得随访,随访3-57个月,平均28.1月,2例患者分别于术后4月、14月出现伤口感染；2例患者于术后1.5年复发。临床骨愈合时间为3-9个月,平均5个月,其中3例分别于术后12月、24月、26月取出内固定。采用Enneking功能评估标准对随访时间超过24个月的共16例患者进行术后功能评分。术后6月平均评分21.6分,其中优4例,良11例,尚可1例；术后12月平均评分24分,其中优7例,良9例；术后24月平均评分24.7分,其中优9例,良6例,尚可1例。2.使用一般评价原则,在不明显影响骨管、骨板模型抗压强度的情况下,对骨管钻孔的“孔径-孔间距（mm）”的临界值为“1.5-3”,“2.0-4”,“2.5-5”,“3.0-6”,“3.5-7”,“4.0-7”,对骨板钻孔的“孔径-孔间距（mm）”的临界值为“1.5-2”,“2.0-3”,“2.5-4”,“3.0-5”,“3.5-5”,“4.0-6”；使用安全系数法评价原则,在不明显影响骨管、骨板模型抗压强度的情况下,对骨管钻孔的“孔径-孔间距（mm）”的临界值为“1.5-4”,“2.0-5”,“2.5-7”,“3.0-8”“3.5-9”,“4.0-10”,对骨板钻孔的“孔径-孔间距（mm）”的临界值为“1.5-4”“2.0-5”,“2.5-5”,“3.0-6”,“3.5-7”,“4.0-9”：结论1.计算机辅助技术能从三维立体角度对大段骨缺损进行精确分析研究,CAD设计的个性化辅助手术模板、个性化假体及模拟手术过程,保证了手术按照计算机设计方案顺利进行,通过术后随访和功能评价,显示了此技术对大段骨缺损修复的良好疗效,是临床治疗大段骨缺损的有效方法,并具有一定的优势。2.经临床观察,采用大块骨中央均匀钻孔、点状植入自体骨的方法可以改善成骨效果,加快异体骨的活化。通过三维有限元分析,推荐对异体骨钻孔的“孔径-孔间距”组合为"2.5mm-7mm", "3.0mm-8mm", "3.5mm-9mm",作为临床参考使用。
李康杰,孙抒[8]（2011）在《去除移植免疫反应抗原成分脱细胞天然骨基质的制备》文中研究指明背景:同种异体骨来源广泛,便于大量加工贮存,如能去除其免疫排斥反应用于骨支架修复骨缺损,将很好地解决骨源问题,但目前去除免疫排斥的方法不尽理想。目的:运用低渗-脱细胞联合过氧化氢去除骨基质中引起免疫排斥反应的抗原成分。方法:将SD大鼠股骨经低渗-脱细胞、过氧化氢处理制备天然脱细胞基质,再通过苏木精-伊红和甲苯胺蓝染色、扫描电镜与透射电镜观察、有机成分分析、洗脱剂残留量测定和移植免疫分析方法评估处理效果,并与新鲜大鼠股骨标本作比较。结果与结论:组织学观察可见处理后的脱细胞骨基质中胶原纤维排列规则,骨陷窝空虚,未见细胞,纤维连接蛋白和层粘连蛋白多存留在骨陷窝周边部。扫描电镜观察见处理后的骨基质板层连接疏松,板层之间出现大量孔隙;透射电镜见骨陷窝区已无高密度影;高效液相色谱仪检测TritonX-100在脱细胞骨基质中几无残留。光镜及扫描电镜均可见新鲜骨中有大量细胞成分。淋巴细胞刺激实验表明新鲜骨引起的免疫排斥反应明显强于脱细胞骨基质（P < 0.01）。说明联合应用低渗-脱细胞和过氧化氢处理基质的方法去除免疫排斥反应较为理想。
禹晓东[9]（2009）在《BMP-2及CD31在异种骨移植愈合中的表达研究》文中认为目的:观察BMP-2及CD31在带部分松质骨的小牛皮质骨板移植愈合过程中不同时相的表达及组织分布情况,探讨其愈合机制及再血管化情况与骨改建的关系,为进一步的组织工程骨奠定实验基础。方法:本实验动物选用健康三月龄新西兰大白兔。将72只新西兰大白兔随机编号分成3组,Ⅰ组、Ⅱ组、和Ⅲ组各24只。Ⅰ组植入带部分松质骨的小牛皮质骨骨板;Ⅱ组植入皮质骨骨板;Ⅲ组取自体髂骨植入。分别于术后4周、8周、12周和24周各时间点取材,通过一般情况、大体标本、X线检查、组织学及BMP-2、CD31免疫组织化学染色观察其愈合情况,并借助计算机图像分析仪进行定量分析,分别用再血管化指数与新骨形成面积代表再血管化和骨改建程度,探讨移植骨再血管化与骨改建的关系。结果:（1）各组材料植入兔髂骨后,切口均为Ⅰ期愈合,未见明显炎症和排斥反应。（2）X线显示:术后24周Ⅰ组见明显愈合;Ⅱ组愈合较差;Ⅲ组完全愈合。（3）组织学观察:术后4周、8周和12周,Ⅰ组、Ⅱ组、和Ⅲ组见宿主骨-移植骨结合部及周围均可见数量不等骨痂形成,Ⅰ组松质骨内见新生血管形成及类骨质沉积,钙化成骨;术后24周Ⅰ组、Ⅱ组移植骨周围见板层状致密骨痂,Ⅲ组完全愈合。（4）BMP-2术后4周、8周和12周,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组宿主骨-移植骨结合部骨痂内,Ⅰ组松质骨内幼稚的软骨细胞、成骨细胞、骨细胞,类骨质中均可见阳性表达;各组移植骨内部扩大的哈弗氏管内“镶边状”排列的成骨细胞呈强阳性表达;术后24周,各组移植骨周围板层状致密骨痂中见弱阳性表达。（5）CD31术后4周、8周,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组移植骨周围的软组织中、结合部、周围的骨痂及软骨巢周围见较多强阳性表达;Ⅰ组松质骨内较多阳性表达,内见单个、条索状、团簇状新生血管,各组移植骨内部扩大的哈弗氏管及周围见阳性表达;术后24周,Ⅰ组、Ⅱ组移植骨内扩大的哈弗氏管及周围呈强阳性表达,新生血管继续增多。（6）再血管化与骨改建①再血管化指数:术后4周、8周、12周,24周各组再血管化指数有显着性差异（P＜0.05）,即再血管指数:Ⅲ组＞Ⅰ组＞Ⅱ组。②新骨形成面积:术后4周,Ⅰ组和Ⅱ组无显着性差异（P＞0.05）,Ⅰ组和Ⅱ组与Ⅲ组相比,均有显着性差异（P＜0.05）,即Ⅲ组＞Ⅰ组和Ⅱ组;术后8周、12周和24周各组相比有显着性差异（P＜0.05）,即新骨形成面积:Ⅲ组＞Ⅰ组＞Ⅱ组。③新骨形成面积和再血管化指数的相关性分析:对新骨形成面积和再血管化指数的计量资料进行相关性分析表明,各组均呈高度正相关（rⅠ=0.984,rⅡ=0.953,rⅢ=0.992）。结论:（1）BMP-2的阳性表达在异种骨移植愈合的全过程中均可见到,其阳性表达与新骨形成一致。皮松骨组BMP-2的表达始终强于皮质骨组,尤其是在4周,8周早期阶段。（2）CD31的阳性表达贯穿于异种骨愈合的整个过程,而且不同时段、不同部位的CD31表达是不同的,皮松骨组CD31的表达明显强于皮质骨组。（3）骨移植后再血管化程度与骨改建呈高度正相关,带部分松质骨的皮质骨和皮质骨相比有较高的再血管化指数和骨改建程度。（4）异种骨板移植愈合的过程中,主要存在宿主骨-异种骨结合端、异种骨外表面及周围、哈弗管内三个愈合界面,新骨的“爬行替代”是立体的,主要靠骨传导实现。
王晶彦[10]（2009）在《中药骨碎补构建优异活性的骨修复材料研究》文中认为本研究期望结合猪骨型羟基磷灰石（porcine bone hydroxyapatite, PBHA）或双相磷酸钙（biphasic calcium phosphate, BCP）和壳聚糖（chiston, CS）各自的优点,并对之进一步进行改性,通过优化设计赋予其良好生物活性。并将中药骨碎补（Drynariae Rhizoma, DR）作为诱导骨形成的功能材料引入骨修复材料中,以真空冷冻干燥方法制备DR-PBHA-CS、DR-BCP-CS多孔生物材料,使其在不外加活体细胞和生长因子的情况下具有诱导组织再生的能力。测定了多孔材料的抗压强度和孔隙率,采用扫描电镜、X射线衍射和傅立叶红外光谱分析材料的微观形貌及组织结构,通过体外模拟和兔体内种植研究其生物活性。结果表明:采用螯合型焦磷酸钛酸酯偶联剂（NDZ-311）和硅烷偶联剂（KH-570）分别对壳聚糖和双相磷酸钙、猪骨型羟基磷灰石改性,使多孔材料的抗压强度有所提高,范围在0.15.6MPa之间。所制备DR-PBHA-CS、DR-BCP-CS多孔生物材料具有多孔结构,孔径在50μm500μm之间,大多数孔径为100μm200μm。孔隙率介于45%91%之间,气孔连通性良好。随着壳聚糖含量的增加,多孔材料的孔隙率逐渐增加,孔结构呈板条层叠状,在支架孔壁上均匀分布着PBHA颗粒。材料在模拟体液（SBF）浸泡后,表面均可形成类骨磷灰石,说明多孔材料具有较好的生物活性,材料在SBF浸泡过程中pH值稳定在6.827.42之间,说明所制备的材料在SBF中能稳定存在。组织观察表明,中药骨碎补的加入,加快新生骨形成和成熟。骨密度测定结果显示骨缺损区域骨密度随种植时间延长逐渐增加,植入四周就有新骨生成,多孔材料复合体植入骨缺损区后,具有良好的骨修复效果。研究表明DR-PBHA-CS和DR-BCP-CS多孔生物材料具有良好的结构特性和生物活性,有望应用于组织工程骨的构建。
二、异种骨移植免疫学研究现状及进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、异种骨移植免疫学研究现状及进展（论文提纲范文）
（1）冷冻干燥及高温煅烧制备去抗原异种骨支架材料的理化性能及生物相容性研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 研究对象及目的 |
| 2 主要试剂及仪器 |
| 3 内容与方法 |
| 3.1 制备去抗原异种骨支架材料 |
| 3.2 浸提液制备 |
| 4 材料性能检测 |
| 4.1 支架材料的组织学观察 |
| 4.2 超微结构观察 |
| 4.3 孔隙率测定 |
| 4.4 力学性能的测量 |
| 4.5 化学性能测定 |
| 4.6 细胞毒性试验 |
| 4.7 急性毒性试验 |
| 4.8 热源实验 |
| 4.9 皮内刺激试验 |
| 5 质量控制 |
| 6 统计学分析 |
| 7 技术路线图 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（2）异种骨移植材料修复兔桡骨缺损的免疫学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 缩略词简表 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要试剂与仪器 |
| 2.1.1 材料来源 |
| 2.1.2 主要仪器设备 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.2 实验方法与步骤 |
| 2.2.1 动物分组 |
| 2.2.2 手术步骤 |
| 2.2.3 术后处理 |
| 2.2.4 处置 |
| 2.2.5 流式细胞仪检测外周CD4+、CD8+T淋巴细胞 |
| 2.2.6 ELISA法检测检测兔白细胞分化抗原4(CD4)、兔白细胞分化抗原8(CD8)及统计分析方法 |
| 2.2.7 RT-PCR法检测IgG |
| 2.2.8 ELISA法检测检测兔血清抗体IgG及统计分析方法 |
| 2.2.9 组织学观察步骤 |
| 2.2.10 数据处理及统计学分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 各实验组术后一般情况观察 |
| 3.2 流式细胞仪检测各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞结果 |
| 3.2.1 流式细胞仪检测项目及意义 |
| 3.2.2 各实验组术后3d,7d,14d,28d,56d CD4+和CD8+T淋巴细胞检测结果及统计分析 |
| 3.2.3 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d CD4+和CD8+T淋巴细胞检测结果均值比较 |
| 3.3 ELISA法检测各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d外周血白细胞分化抗原4(CD4)、兔白细胞分化抗原8(CD8)结果 |
| 3.3.1 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d CD4和CD8检测结果及统计分析 |
| 3.3.2 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d ELISA法检测外周血CD4和CD8标准曲线及结果均值比较(见图5-图8) |
| 3.4 RT-PCR法检测各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d植骨材料IgG表达水平结果 |
| 3.4.1 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d植骨材料及周围组织IgG表达水平检测结果及统计分析 |
| 3.4.2 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d外周IgG检测结果及统计分析 |
| 3.4.3 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d植骨材料及周围组织IgG表达水平检测结果均值比较 |
| 3.5 ELISA法检测各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d外周IgG |
| 3.5.1 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d外周IgG检测结果及统计分析 |
| 3.5.2 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d外周血IgG检测标准曲线及结果均值比较 |
| 3.6 各实验组术后3d、7d、14d、28d、56d组织学切片染色镜下观察结果 |
| 3.6.1 空白组术后3d、7d、14d、28d、56d组织学切片染色镜下观察结果 |
| 3.6.2 胃蛋白酶组术后3d、7d、14d、28d、56d组织学观察结果 |
| 3.6.3 自体骨组术后3d、7d、14d、28d、56d组织学观察结果 |
| 3.6.4 骨基质组术后3d、7d、14d、28d、56d组织学观察结果 |
| 3.6.5 过氧化氢组术后3d、7d、14d、28d、56d组织学观察结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（3）bFGF转染骨髓间充质干细胞附和支架材料的动物实验（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 实验动物 |
| 3 主要试剂及仪器 |
| 4 实验方法 |
| 4.1 同种异体骨支架材料的制备 |
| 4.2 骨髓抽取及细胞培养 |
| 4.3 成骨诱导 |
| 4.4 bFGF 慢病毒载体的构建 |
| 4.5 病毒转染最佳浓度测试 |
| 4.6 转染羊 BMSCs |
| 4.7 BMSCs 爬附支架材料培养 |
| 4.8 羊髂骨极限缺损模型建立 |
| 5 统计学方法 |
| 6 技术路线 |
| 结果 |
| 1 大体观察 |
| 2 扫描电镜 |
| 3 组织切片 |
| 4 X 线片 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学位论文 |
| 导师评阅表 |
（4）复合同种异体骨修复长段骨缺损的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况说明 |
| 致谢 |
（5）同种异体骨移植后T淋巴细胞的分布与变化（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 资料和方法 |
| 1.1 资料提取策略 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 检索结果及评价 |
| 2 结果 |
| 3 小结 |
（7）计算机辅助临床大段骨缺损的精确修复（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1 临床大段骨缺损的研究和治疗现状 |
| 1.1 中医对骨缺损的论治 |
| 1.2 西医对骨缺损的论治 |
| 2 计算机辅助手术在骨科的应用 |
| 第一部分 计算机辅助临床大段骨缺损的精确修复 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 临床资料 |
| 2.2 病例选择标准 |
| 2.3 术前准备 |
| 2.4 手术方法 |
| 2.5 术后处理 |
| 2.6 观察项目 |
| 3 结果 |
| 3.1 一般情况 |
| 3.2 植骨情况 |
| 3.3 术后并发症 |
| 3.4 影像学疗效判定 |
| 3.5 功能评价 |
| 4 典型病例 |
| 4.1 病例1 |
| 4.2 病例2 |
| 4.3 病例3 |
| 5 讨论 |
| 5.1 计算机辅助个性化分析大段骨缺损 |
| 5.2 计算机辅助手术模板的设计与制作 |
| 5.3 计算机辅助设计在肢体畸形并短缩中的应用 |
| 5.4 计算机辅助设计在肿瘤性骨缺损中的应用 |
| 5.5 大段骨移植的成骨效果 |
| 第二部分 钻孔对异体骨抗压强度影响的三维有限元分析 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料和设备 |
| 2.2 建立三维有限元模型 |
| 2.3 钻孔对异体骨抗压强度影响的三维有限元分析 |
| 2.4 数据分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 实验数据 |
| 3.2 一般评价 |
| 3.3 使用安全系数评价 |
| 4 讨论 |
| 4.1 有限元分析法 |
| 4.2 三维有限元模型的建立及材料参数的设定 |
| 4.3 关于使用安全系数评价 |
| 4.4 有限元分析结果的选择 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（8）去除移植免疫反应抗原成分脱细胞天然骨基质的制备（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 组织学观察结果 |
| 2.2 纤维连接蛋白和层粘连蛋白检测结果 |
| 2.3 扫描电镜观察结果 |
| 2.4 透射电镜观察结果 |
| 2.5 Triton X-100残留测定结果 |
| 2.6 移植免疫分析结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 骨基质材料的处理方法选择 |
| 3.2 脱细胞天然骨基质材料的有机成分分析 |
（9）BMP-2及CD31在异种骨移植愈合中的表达研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词简表 |
| 前言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1. 实验动物、主要试剂与仪器 |
| 2. 实验方法及步骤 |
| 3. 观察指标 |
| 4. 统计学方法处理 |
| 第二章 结果 |
| 1. 一般情况 |
| 2. 大体标本观察 |
| 3. 术后X-ray片观察 |
| 4. 组织学H-E染色结果 |
| 5. BMP-2，CD31免疫组织化学结果 |
| 6. 统计学分析 |
| 第三章 讨论 |
| 1. BMP-2在异种骨移植愈合过程中的表达 |
| 2. CD31在异种骨移植愈合过程中的表达 |
| 3. 异种骨移植再血管化与骨改建的关系 |
| 4. 异种骨移植愈合过程的愈合界面 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）中药骨碎补构建优异活性的骨修复材料研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 骨缺损的修复 |
| 1.2.1 骨缺损修复的方法 |
| 1.2.2 骨缺损修复的材料 |
| 1.3 异种骨骨修复材料的研究进展 |
| 1.3.1 异种骨移植的相关研究 |
| 1.3.2 复合异种骨 |
| 1.3.3 异种骨粉的复合材料 |
| 1.4 双相磷酸钙(BCP)的应用研究 |
| 1.5 壳聚糖的性质及应用研究 |
| 1.5.1 壳聚糖复合生物材料的研究进展 |
| 1.5.2 壳聚糖的改性及作为生物材料的应用研究 |
| 1.6 中药骨碎补及其药理作用 |
| 1.7 复合多孔材料的制备方法 |
| 1.7.1 制备多孔支架材料的方法 |
| 1.7.2 冷冻干燥法 |
| 1.8 骨组织工程材料存在的问题与发展趋势 |
| 1.9 选题意义及主要研究内容 |
| 1.9.1 设计思想 |
| 1.9.2 选题目的和意义 |
| 1.9.3 主要研究内容 |
| 第2章 实验材料及方法 |
| 2.1 实验材料及制备 |
| 2.1.1 中药骨碎补的破碎及提取 |
| 2.1.2 猪骨型羟基磷灰石的制备 |
| 2.1.3 双相磷酸钙的制备 |
| 2.1.4 壳聚糖 |
| 2.1.5 中药骨碎补-生物陶瓷-壳聚糖多孔生物材料的制备 |
| 2.2 材料分析测试方法 |
| 2.2.1 孔隙率的测试 |
| 2.2.2 抗压强度测试 |
| 2.2.3 扫描电子显微镜观察 |
| 2.2.4 TG-DSC 分析 |
| 2.2.5 X 射线衍射相分析 |
| 2.2.6 傅立叶变换红外光谱分析 |
| 2.3 模拟体液中的生物活性实验 |
| 2.4 体内种植实验 |
| 第3章 实验原材料的改性及结构性能 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 骨碎补的结构 |
| 3.3 PBHA 的改性及结构性能 |
| 3.4 双相磷酸钙的改性及结构性能 |
| 3.5 壳聚糖的溶解及改性 |
| 3.6 本章小结 |
| 第4章 DR-PBHA-CS 多孔生物材料的制备工艺及性能研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 DR-PBHA-CS 多孔生物材料的改性结果 |
| 4.2.1 改性处理前后制备的材料 |
| 4.2.2 硅烷偶联剂的用量对 DR-PBHA-CS 多孔材料性能的影响 |
| 4.3 混合工艺对浆料均匀化的影响 |
| 4.4 预冻温度对 DR-PBHA-CS 多孔材料 SEM 形貌影响 |
| 4.5 骨碎补的用量设计 |
| 4.6 DR-PBHA-CS 多孔生物材料的结构及性能影响 |
| 4.6.1 壳聚糖浓度对多孔生物材料性能的影响 |
| 4.6.2 CS 含量对 DR(粉)-PBHA-CS 多孔材料结构及性能影响 |
| 4.6.3 中药骨碎补的加入形式对多孔生物材料结构及性能的影响 |
| 4.7 DR-PBHA-CS 多孔材料在模拟体液中的生物活性研究 |
| 4.7.1 SBF 浸泡过程中的试样质量变化研究 |
| 4.7.2 浸泡过程中模拟体液的 pH 值变化 |
| 4.7.3 模拟体液浸泡的多孔材料的表面形貌分析 |
| 4.7.4 多孔材料浸泡前后的 XRD 及能谱分析 |
| 4.7.5 多孔骨修复材料浸泡前后的 FTIR 分析 |
| 4.7.6 多孔骨修复材料表面类骨磷灰石形成机理探讨 |
| 4.8 本章小结 |
| 第5章 DR-BCP-CS 多孔生物材料的制备工艺及性能研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 骨碎补对 DR-BCP-CS 多孔材料的结构及性能影响 |
| 5.2.1 孔隙率和抗压强度 |
| 5.2.2 SEM 观察及分析 |
| 5.2.3 红外光谱分析 |
| 5.3 DR-BCP-CS 多孔生物材料在模拟体液中的活性研究 |
| 5.3.1 SBF 浸泡过程中的材料质量变化 |
| 5.3.2 浸泡过程中 SBF 的 pH 值变化 |
| 5.3.3 模拟体液浸泡的多孔材料的表面形貌分析 |
| 5.3.4 多孔生物材料浸泡前后的 XRD 分析 |
| 5.3.5 生物材料浸泡前后的能谱分析 |
| 5.3.6 多孔骨修复材料表面类骨磷灰石形成机理探讨 |
| 5.4 本章小结 |
| 第6章 引入DR 多孔生物材料的体内种植生物活性研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 大体观察 |
| 6.2.1 DR-PBHA-CS 大体观察 |
| 6.2.2 DR-BCP-CS 大体观察 |
| 6.3 X 光密度测量分析 |
| 6.4 组织学观察 |
| 6.4.1 DR-PBHA-CS 组织学观察 |
| 6.4.2 DR-BCP-CS 组织学观察 |
| 6.5 讨论 |
| 6.6 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 在学研究成果 |
| 致谢 |
| 附录 特殊符号含义 |
四、异种骨移植免疫学研究现状及进展（论文参考文献）
- [1]冷冻干燥及高温煅烧制备去抗原异种骨支架材料的理化性能及生物相容性研究[D]. 杨泽辉. 新疆医科大学, 2014(02)
- [2]异种骨移植材料修复兔桡骨缺损的免疫学研究[D]. 雷鹏飞. 中南大学, 2013(06)
- [3]bFGF转染骨髓间充质干细胞附和支架材料的动物实验[D]. 杨楠. 新疆医科大学, 2013(02)
- [4]复合同种异体骨修复长段骨缺损的实验研究[D]. 陈晨. 第二军医大学, 2012(10)
- [5]同种异体骨移植后T淋巴细胞的分布与变化[J]. 李世光,潘乐. 中国组织工程研究, 2012(18)
- [6]脱细胞骨基质的立体构筑及TritonX-100残留量测定[J]. 王昊,柏树令. 中国医科大学学报, 2011(06)
- [7]计算机辅助临床大段骨缺损的精确修复[D]. 易灿. 广州中医药大学, 2011(11)
- [8]去除移植免疫反应抗原成分脱细胞天然骨基质的制备[J]. 李康杰,孙抒. 中国组织工程研究与临床康复, 2011(08)
- [9]BMP-2及CD31在异种骨移植愈合中的表达研究[D]. 禹晓东. 中南大学, 2009(04)
- [10]中药骨碎补构建优异活性的骨修复材料研究[D]. 王晶彦. 佳木斯大学, 2009(06)