一、口腔鳞癌中VEGF表达和微血管密度及与临床病理、预后关系的研究（论文文献综述）
赵星星[1]（2020）在《CD68+CAFs调控Tregs细胞募集影响口腔鳞癌进程的研究》文中认为【研究背景】口腔鳞状细胞癌（Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC）是头颈部最常见的恶性肿瘤,死亡率常年居高不下。肿瘤的发生发展依赖于合适的土壤,即肿瘤微环境,微环境中最丰富的间质细胞即肿瘤相关成纤维细胞（Cancer-Associated Fibroblasts,CAFs）在肿瘤的恶性增殖、转移、免疫耐受及治疗抵抗等方面发挥重要的调控作用。众多研究发现OSCC中CAFs高密度浸润提示肿瘤更高的病理分期、T分级、淋巴结转移和复发率等,并且与患者生存预后息息相关。然而CAFs作为异质性的细胞群体,来源不同,表型各异,不同表型CAFs在肿瘤微环境中可能发挥不同功能。因此,探索OSCC中CAFs分子表型,分析不同表型CAFs与口腔鳞癌预后的关系,探讨CAFs与肿瘤微环境的相互影响,对于提高精准靶向肿瘤微环境的抗肿瘤治疗具有直接的临床指导价值和重要的理论意义。本研究通过高通量测序发现CD68是CAFs中显着高表达的蛋白,进而探究CD68+CAFs在OSCC中表达及临床意义,深入阐述CD68+CAFs对OSCC肿瘤进程的影响及具体分子机制。一、CD68+CAFs在口腔鳞癌中的分布及意义【目的】验证CD68+CAFs在细胞和组织学水平的表达情况,分析CD68+CAFs与OSCC患者临床病理参数的相关性以及对患者生存率的影响,探讨CD68+CAFs对于OSCC患者预后的临床价值。【方法】收集2003年1月1日至2013年12月31日在南京大学医学院附属口腔医院颌面外科接受初次手术治疗的口腔鳞癌患者石蜡组织样本104例,2015年1月1日至2017年11月8日口腔鳞癌患者术后新鲜组织样本14例。分离培养成对原代NFs和CAFs用以高通量测序,q PCR、Western blot和免疫荧光的方法验证在CAFs中CD68的基因和蛋白表达情况。口腔鳞癌患者生存资料以COX单因素和多因素统计学方法分析,分析CD68+CAFs与临床参数的相关性,以及对总生存率（OS）、无复发生存率（RFS）、无转移生存率（MFS）和无病生存率（DFS）的预后价值。【结果】通过高通量测序及生物信息学分析,发现CD68是CAFs相较于NFs显着上调的基因之一。q PCR、Western blot和细胞免疫荧光均证实CAFs中CD68的高表达。组织免疫荧光可见正常粘膜冰冻切片中NFs基本不表达CD68,而OSCC组织存在大量高表达CD68的CAFs。临床病理资料分析发现在口腔黏膜上皮异常增生并逐渐发展到口腔鳞癌过程中,CD68+CAFs的浸润逐渐升高。癌巢间质CD68+CAFs表达低的患者术后复发率更高（P=0.022）,炎性细胞浸润程度更低（P<0.000）。患者癌巢内高表达CD68+CAFs提示更好的OS（P=0.029）,RFS（P=0.023）和DFS（P=0.024）。浸润前沿中CD68+CAFs的高表达提示患者更好的DFS（P=0.026）。CD68在OSCC癌巢中CAFs的高表达是更好的OS（P=0.034,Exp（B）=0.457,95%CI:0.222-0.943）、RFS（P=0.035,Exp（B）=0.253,95%CI:0.071-0.909）、DFS（P=0.031,Exp（B）=0.380,95%CI:0.157-0.916）的相关因素,同时浸润前沿CAFs中CD68的高表达也与更好的DFS（P=0.033,Exp（B）=0.384,95%CI:0.159-0.927）相关。COX单因素和多因素回归分析发现不论是癌巢中还是浸润前沿CD68+CAFs的表达并不是OSCC的独立预后因素。【小结】基于高通量测序结果,我们提出OSCC中存在一群高表达CD68的CAFs亚群,在正常黏膜至原位癌的肿瘤进展中CD68表达逐渐增高,并与组织炎性浸润程度和患者术后复发相关,预后分析发现癌巢中CD68+CAFs的高表达是OS、RFS、DFS的影响因素,浸润前沿CD68+CAFs高表达也是DFS的影响因素。提示CD68+CAFs可能参与了口腔鳞癌的发生和发展,可作为预测OSCC患者预后的重要辅助指标。二、CD68+CAFs对肿瘤细胞增殖、迁移和Tregs细胞募集的影响【目的】CD68作为巨噬细胞标志物,可能参与炎症反应及抗原传递。探究CD68是否参与NFs-CAFs表型转化,研究CD68+CAFs对于肿瘤细胞增殖、迁移功能以及免疫微环境中Tregs细胞调控的影响。【方法】成功构建CD68过表达质粒pc DNA3.1+CD68和CD68干扰si RNA,利用q PCR、Western blot实验检测NFs中过表达CD68及CAFs中干扰CD68后CAFs相关标志物N-cadherin、Vimentinm、α-SMA的基因及蛋白水平变化。利用成纤维细胞条件上清处理口腔鳞癌细胞系Cal27或者将条件处理的成纤维细胞与Cal27直接共培,通过CCK8、Tranwell及流式细胞术检测干扰CD68后CAFs对Cal27增殖功能的影响,通过Tranwell和划痕实验检测成纤维细胞内CD68表达变化对肿瘤细胞迁移功能的影响。收集健康人外周血分离外周血单个核细胞进行趋化实验,通过流式细胞术检测CAFs干扰CD68后或条件上清处理后的Cal27细胞对Tregs趋化作用的影响。【结果】在NFs中过表达CD68或CAFs中干扰CD68后,α-SMA、FSP-1、N-cadherin和Vimentin等CAFs标志物基因表达水平无明显变化,N-cadherin、Vimentinm、α-SMA等CAFs标志物的蛋白表达也无显着改变。不论在CAFs条件上清与肿瘤细胞间接共培或者CAFs与肿瘤细胞直接共培体系中,成纤维细胞中CD68的表达变化都不能显着改变肿瘤细胞的增殖活性和迁移能力。q PCR检测发现原代CAFs本身表达CCL17和CCL22的m RNA量很低,干扰CAFs中CD68的表达不引起CCL17或CCL22的表达变化,对Tregs细胞的趋化作用也没有显着变化。使用CAFs条件上清处理肿瘤细胞后能够促进肿瘤细胞自身CCL17和CCL22的表达显着升高。在趋化实验中发现,干扰CAFs中CD68后上清处理的肿瘤细胞对Tregs的趋化作用增强。【小结】CAFs可通过直接接触或分泌细胞因子等与肿瘤细胞间接作用,参与肿瘤进程。CD68并不参与NFs向CAFs恶性转化和CAFs表型维持。CD68在成纤维细胞中的表达水平在间接或直接作用中均不能显着影响肿瘤增殖和迁移能力。CD68+CAFs并不直接参与募集外周血中Tregs细胞,而是通过作用于肿瘤细胞,增强肿瘤细胞CCL17和CCL22表达,促进对Tregs募集,来创造免疫抑制的微环境。三、CD68+CAFs调控Tregs细胞募集的机制研究【目的】探究干扰CD68后CAFs中激活的信号通路,以及干扰CD68的CAFs条件上清中何种细胞因子的改变能够刺激肿瘤细胞分泌表型发生改变,阐明CD68表达变化对CAFs旁分泌功能的影响及具体分子机制。【方法】选择2003年1月1日至2010年12月31日在南京市口腔医院颌面外科接受初次手术治疗的口腔鳞癌患者组织样本共49例进行连续切片,免疫组化验证CD68+CAFs与OSCC肿瘤微环境中CD3、CD4、CD8、Foxp3及Ki67的表达关系。Western blot检测探究CAFs干扰CD68后主要活化的信号通路及通路磷酸化情况,ELISA筛选参与CAFs调控肿瘤招募Tregs相关的细胞因子,利用多种通路抑制剂找出显着差异表达的细胞因子。结合数据库筛选信号通路的关键转录因子,最后从Transwell功能实验验证该信号通路及细胞因子变化对肿瘤细胞趋化Tregs作用的影响。【结果】OSCC组织中高表达CD68+CAFs提示更多CD3+T细胞和CD4+T细胞浸润,而CD68+CAFs浸润低的患者中有更高的Foxp3+Tregs细胞浸润,提示CD68+CAFs减少确实可通过促进Tregs细胞浸润参与OSCC免疫抑制微环境的形成。Western blot检测结果发现,在CAFs中干扰CD68表达后,JAK2和STAT3的总蛋白和磷酸化蛋白水平均有显着增加,p38总蛋白量稍有增加。加入通路抑制剂AG490和SB203580后能够显着抑制CD68干扰后引起的CCL2、IL-1β表达升高的幅度,ELISA检测上清细胞因子分泌结果类似。干扰细胞因子的关键转录因子STAT3能显着下调CCL2、IL-1β表达。Transwell趋化实验证实CAF-si CD68上清能显着增强Cal27细胞对Tregs的募集,而加入通路抑制剂或干扰STAT3后显着抑制了Cal27对Tregs募集作用。【小结】CD68+CAFs与OSCC免疫微环境Tregs浸润相关,CAFs干扰CD68可通过激活STAT3转录因子刺激CCL2、IL-1β表达,作用于肿瘤细胞。干扰相应信号通路或转录因子STAT3后能够抑制细胞因子的表达,抑制肿瘤细胞对Tregs细胞的募集作用。以上结果表明,JAK2-STAT3信号通路很可能是CD68+CAFs参与免疫调控的重要活化信号通路。
胡建明[2]（2017）在《HLA-DR调控巨噬细胞在哈萨克族食管癌浸润转移中作用与机制的初步研究》文中指出第一部分巨噬细胞在哈族食管鳞癌组织的分布特征及其临床病理学意义目的:探讨不同亚型的巨噬细胞和表型分子与侵袭转移相关蛋白在哈族食管鳞癌组织中的表达、分布特征及其与临床病理特征、预后的相关性。方法:（1）收集哈族食管鳞癌和癌旁正常组织280例,制备白片和组织芯片;（2）应用免疫组化法进行CD68,HLA-DR双染和CD163染色,分别检测M1和M2型巨噬细胞在哈族食管鳞癌组织中的分布,并分析其与食管鳞癌患者临床病理及预后的关系。（3）以CD34和D2-40为标记检测微血管和淋巴管在食管鳞癌组织中的分布;应用免疫组化法检测HLA-DR、浸润转移相关基因VEGF和MMP9的表达情况及其临床病理学意义;（4）综合分析哈族食管鳞癌组织中巨噬细胞的密度与HLA-DR、VEGF和MMP-9的表达及微血管和淋巴管的密度之间的相关性;结果:（1）M1和M2型巨噬细胞分布于食管鳞癌的癌巢和癌周间质中,癌周间质中巨噬细胞密度明显高于癌巢;哈族食管鳞癌组织癌巢和间质中M1、M2型巨噬细胞的密度明显高于癌旁正常组织（癌巢中M1型密度:3.28±2.23 vs 1.04±0.86,间质M1型密度:11.67±5.8vs6.41±2.05;癌巢中 M2 型密度:13.18±11.24 vs 1.73±1.73,间质M2型密度:55.21±25.71 vs20.90±9.60;P均<0.001）,哈族食管鳞癌组织中M2/M1巨噬细胞的比值同样明显高于癌旁正常组织（癌巢:4.96±4.47vs 1.57±1.67;间质:6.44±5.81 vs 3.53±1.75;P均<0.001）;（2）结合临床病理参数,我们发现间质中M1型巨噬细胞密度与食管鳞癌患者淋巴结转移呈明显的负相关（P<0.05）,而癌巢和间质中M2型巨噬细胞密度和M2/M1比值与哈族食管鳞癌患者脉管浸润、淋巴结转移和临床分期呈明显正相关（P均<0.05）,同时发现M2/M1巨噬细胞比值在食管鳞癌间质中还与肿瘤的浸润深度呈明显的正相关（P<0.05）;间质中高密度的M2型巨噬细胞和高M2/M1比值预示食管鳞癌患者较差的预后（P<0.05）;Cox多因素回归分析发现M2型巨噬细胞的密度与患者不良预后密切相关（P<0.05）,可以作为哈族食管鳞癌患者的独立预后因素。（3）巨噬细胞是HLA-DR重要的表达组成细胞之一,食管鳞癌组织中HLA-DR表达明显高于癌旁正常组织,但与哈族食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移及临床分期呈明显的负相关（P<0.05）;哈族食管鳞癌组织VEGF和MMP9的表达及微血管和淋巴管的分布数量明显高于癌旁正常组织,且与哈族食管鳞癌患者淋巴结转移和临床分期呈正相关（P均<0.05）;（4）结合M2巨噬细胞的在食管鳞癌的分布特点,分析发现间质中的M2型巨噬细胞及M2/M1的比值与HLA-DR的表达呈明显负相关,与微血管、淋巴管的分布、VEGF和MMP9的表达呈明显正相关（P均<0.05）;结论:（1）M2型巨噬细胞的增加与哈萨克族食管癌组织中微血管、淋巴管的密度以及患者脉管浸润、淋巴结转移和临床分期呈明显正相关,高密度的M2型巨噬细胞可能是哈族食管鳞癌高侵袭性和不良预后的重要参考指标;（2）M2型巨噬细胞密度的增高与表型分子HLA-DR表达的降低及侵袭转移相关蛋白VEGF和MMP9的过表达呈正相关,提示这些分子可能参与哈族食管癌的浸润和转移过程。第二部分HLA-DR介导巨噬细胞对食管癌生物学行为的影响及机制初探目的:探讨HLA-DR介导巨噬细胞表型的转化对食管鳞癌细胞生物学行为的影响及其初步作用机制。方法:（1）利用Transwell小室将巨噬细胞与食管鳞癌细胞非接触性共培养,通过免疫荧光、实时定量qRT-PCR法检测共培养前后巨噬细胞的表型（CD163,HLA-DR/CD68,HLA-DR,TNF-a,IL-10）的改变,应用倒置显微镜观察共培养前后肿瘤细胞形态的变化:（2）采用qRT-PCR和westernblot检测共培养后巨噬细胞中侵袭转移相关基因VEGF和MMP9表达的变化;应用CCK8、集落克隆形成实验、Transwell迁移及侵袭实验分别检测巨噬细胞对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;（3）慢病毒shRNA转染下调巨噬细胞中HLA-DR的表达,应用免疫荧光、qRT-PCR和westernblot检测转染后巨噬细胞表型的改变;qRT-PCR和westernblot检测下调HLA-DR的巨噬细胞所产生侵袭转移相关基因VEGF和MMP9表达的变化;应用CCK8增殖、Transwell迁移及侵袭实验分别检测下调HLA-DR的巨噬细胞对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:（1）食管鳞癌细胞与巨噬细胞共培养48h后,免疫荧光显示CD163阳性巨噬细胞（M2型）数目明显增多,CD68/HLA-DR双染（M1型）巨噬细胞数目明显减少;qRT-PCR检测同样显示巨噬细胞M2表型标记IL-10表达明显增高,而M1表型标记HLA-DR和TNF-a表达明显降低（P<0.05）;westernblot检测从蛋白水平也证实了共培养后M2表型巨噬细胞的增多;（2）共培养后多数食管鳞癌细胞由圆形上皮特性变为梭形间叶细胞特性,同时发现共培养后巨噬细胞中MMP9和VEGF mRNA和蛋白表达明显增加（P<0.05）;CCK8增殖和集落克隆形成实验显示食管鳞癌细胞增殖活性与对照组相比明显降低（P<0.05）;Transwell迁移和侵袭实验显示共培养后食管鳞癌细胞的迁移和侵袭能力均明显增加（P均<0.05）;（3）干扰下调巨噬细胞中HLA-DR的表达后,巨噬细胞中HLA-DR、TNF-a的表达明显下调,IL-10表达明显升高（P均<0.05）,显示更多巨噬细胞向M2表型巨噬细胞的转化;（4）共培养体系中下调HLA-DR的巨噬细胞所产生的MMP9和VEGF明显增多（P均<0.05）;下调HLA-DR的巨噬细胞与食管鳞癌细胞共培养后,食管鳞癌细胞增殖能力明显提高,肿瘤细胞的迁移和侵袭能力均明显增加（P均<0.05）。结论:（1）巨噬细胞与食管癌细胞共培养促进了 M2型巨噬细胞表型转化和食管癌细胞的侵袭与转移,HLA-DR具有促进M2型巨噬细胞转化的作用;（2）干扰HLA-DR可以影响VEGF和MMP9的表达和食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与HLA-DR下调促进M2表型巨噬细胞转化进而增加VEGF和MMP9的分泌等有关,但具体分子机制尚需进一步的体内外实验研究。
吴训[3]（2016）在《COX-2和SPARC在口腔鳞癌中表达的研究》文中认为口腔颌面-头颈鳞状细胞癌（Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC/Squamous Cell Carcinoma of the Head and Neck,HNSCC）占成人恶性肿瘤的8%[1],口腔颌面-头颈部肿瘤占全身恶性肿瘤的6.6%,而这其中鳞状细胞癌又占到55.8%,口腔和下咽部为高发部位（20.9%）,并呈逐年递增的趋势[2]。2015年中国约有新发浸润性癌病例数429.2万,有281.4万癌症死亡病例,其中,唇、口腔、咽癌年新发病例4.81万,年死亡病例2.21万[3]。几乎22%的全球新发癌症病例出现在中国,27%的癌症死亡病例在中国[3]。OSCC大多临近重要的组织器官,使手术的范围受到严重的制约,而且由于头颈颌面组织血管、淋巴管丰富以及舌的频繁机械运动,常发生早期颈淋巴结转移,预后较差,死亡率高达50%[1],严重威胁着人们的生命健康。尽管肿瘤综合治疗的不断发展,口腔鳞癌的治疗取得了一定的进步,但是近20年,五年生存率没有明显改善。由于口腔颌面-头颈鳞状细胞癌患者总体生存率很低,其发病相关的分子机制尚未明确,关于它的诊断与治疗始终是恶性肿瘤治疗领域的研究热点。尽管众多与肿瘤发生发展相关的生物标志在多项前瞻性研究和Meta分析中得到反复确证,但仍缺乏足够的证据支持临床应用,因此,与OSCC/HNSCC发生发展相关的分子标志的研究仍需不断的探索。初步研究显示,环氧化酶-2（Cyclooxygenases,COX-2）与富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine,SPARC）在OSCC/HNSCC组织中上调明显,提示其与OSCC/HNSCC发生和发展可能有相关性,可能是OSCC/HNSCC复发、转移和治疗指导方面有价值的关键节点基因[4-6]。目的:检测SPARC和COX-2基因在口腔鳞状细胞癌、癌旁、淋巴结以及正常组织中的表达,研究它们在肿瘤发生发展过程中的可能作用机制以及相互关系;对SPARC和COX-2的甲基化情况进行初步的探讨,验证甲基化修饰水平是否能够调控SPARC和COX-2在口腔鳞癌中的表达。方法:应用免疫组织化学、蛋白质免疫印迹、实时定量聚合酶链反应技术检测SPARC和COX-2基因在口腔鳞状细胞癌、癌旁、淋巴结以及正常组织中的表达。甲基化特异性PCR（MSP）检测上述样本中这两个基因的甲基化状态。统计学方法分析上述实验结果。结果:1.免疫组化显示COX-2在癌组织高表达,在正常组织中几乎无表达;其表达含量随肿瘤分化程度降低而逐渐增高,与肿瘤的临床分期、病理分级、淋巴结转移存在明显正相关性。COX-2m RNA的表达量在癌、癌旁、转移淋巴结组织标本中均高于正常粘膜组织,其中在癌组织的表达量最高（P<0.01）;除Ⅳ区与Ⅴ区淋巴结组织中COX-2m RNA的表达量相比不具有统计学意义以外,其余各组间COX-2m RNA的表达均具有明显统计学意义（P<0.01）。2.免疫组化显示SPARC在正常粘膜和癌旁组织呈现高表达,在癌组织中呈低表达或不表达。其表达与肿瘤分化程度和淋巴结转移呈负相关。与正常粘膜组的SPARC m RNA表达量相比,除癌旁组织和Ⅴ区淋巴结不具有统计学意义以外,其余各组表达均低于正常粘膜组织（P<0.05）。3.Western blot发现COX-2和SPARC在正常组织、癌旁组织、口腔鳞癌和淋巴结组织中有不同程度的表达,且蛋白表达水平与二者m RNA表达趋势一致。4.COX-2m RNA和SPARCm RNA的相对表达量在口腔癌组织、癌旁组织、颈部Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ区淋巴结中表现为显着的负相关性P=0.000。5.在头颈鳞癌多个细胞系中COX-2的表达强烈,SPARC表达沉默或低下,二者表达趋势与所测癌组织中表达结果一致。6.在OSCC组织样本中,在癌组织,淋巴结组织中SPARC基因启动子均出现了高甲基化,而COX-2基因启动子则出现非甲基化状态。在正常组织中,COX-2基因启动子则出现高甲基化,SPARC基因启动子则表现出了非甲基化状态。在癌旁组织中,COX-2和SPARC均表现为非甲基化。7.在头颈肿瘤Scc-9、Scc-25、Tca8113、HN13多个细胞系均发现SPARC基因启动子区出现甲基化修饰,而COX-2基因启动子区无甲基化条带。在正常上皮细胞系h OMK则发现COX-2甲基化和SPARC非甲基化。8.在舌癌细胞株中COX-2基因启动子23个Cp G岛仅有36个位点出现甲基化,甲基化率不足10%;SPARC的17个Cp G岛全部出现甲基化修饰。去甲基化处理后,SPARCm RNA的表达出现明显上调（P=0.000）;COX-2m RNA的表达无明显变化,组间比较无统计学差异（P=0.064）。9.COX-2和SPARC蛋白表达状态与启动子区甲基化均存在着负相关关系,P=0.000。结论:1、COX-2在口腔鳞状细胞癌中高表达,与临床TNM分期的密切相关,可能是口腔鳞状细胞癌的促进因子。2、SPARC在口腔鳞状细胞癌中低表达,其表达缺失与临床TNM分期关系密切,可能是口腔鳞状细胞癌的抑制因子,可以作为口腔鳞状细胞癌诊断的分子生物学标志物。3、癌组织中SPARC启动子区甲基化和COX-2启动子区去甲基化是引起二者蛋白表达及m RNA表达异常的重要原因。4、COX-2和SPARC的表达沿纵形淋巴链呈梯度变化,且它们的表达存在着负相关关系,二者在OSCC的发生发展过程中可能存在着某种拮抗作用。
庞静[4]（2013）在《COX-2、MMP-7在口腔鳞癌中的表达及对微血管密度的影响》文中研究指明背景与目的：恶性肿瘤的生长、浸润和转移受多重因素影响，其中肿瘤新生血管为肿瘤的生长提供营养物质，运输代谢产物，在肿瘤发生发展过程中起关键作用。本研究采用免疫组织化学sp法（链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法）检测环氧合酶-2（Cyclooxygenase-2COX-2）、基质金属蛋白酶-7（Matrixmetalloproteinase-7MMP-7）、微血管密度（Microvascular density MVD）在口腔鳞状细胞癌（Oral squamous cell carcinoma OSCC）组织中的表达，结合临床病理资料分析其在肿瘤发生发展中的作用，以探讨两种因子单独或相互作用与口腔鳞癌血管生成的关系。方法：1.选取2005年1月-2011年12月在辽宁省人民医院口腔科手术切除经病理诊断证实为OSCC石蜡标本63例，所有患者临床病历完整，术前未经放化疗治疗，随访资料完整，收集年龄、性别、病理分级资料，另取40例癌旁正常口腔粘膜组织作为对照。2.采用免疫组织化学SP法检测63例口腔鳞癌及40例癌旁正常口腔粘膜组织COX-2、MMP-7、MVD的表达水平，以新生血管内皮细胞标志物CD34标记血管内皮细胞作为计算微血管密度MVD的指标。3.SPSS13.0软件包统计分析OSCC及癌旁正常口腔粘膜组织COX-2、MMP-7及MVD的表达差异，分析在OSCC中COX-2、MMP-7、MVD的表达与临床资料、病理分级的关系，并探讨COX-2、MMP-7二者在肿瘤组织的表达与微血管密度的关系。结果：COX-2在癌旁正常组织中表达阳性率为30%而MMP-7不表达，二者在OSCC中表达的阳性率分别为71.4%和66.7%，MVD在OSCC中的表达为28.6±2.4，高于在癌旁正常组织中的表达10.7±1.11； COX-2、MMP-7的阳性表达与病理分级相关（/K0.05），在肿瘤病理低分级者MVD表达高，与病理分级具有显着相关性（/；<0.05），三者与患者的年龄、性别无相关性；在OSCC中C0X-2、MMP-7的表达与MVD的表达密切相关（/K0.05），并且C0X-2与MMP-7的表达呈正相关性（/=0.59，/K0.05）。结论：在OSCC组织中，COX-2呈高表达，MMP-7呈阳性表达，二者对OSCC的病理诊断具有一定的意义;在OSCC组织中，血管生成的数量与C0X-2和MMP-7阳性表达密切相关，OSCC的病理分级低者COX-2和MMP-7表达较高，提示COX-2和MMP-7在OSCC的发生发展中起重要作用。
梁博[5]（2012）在《口腔鳞癌组织中Angiopoietin-1、Angiopoietin-2 mRNA表达及其临床意义》文中研究表明目的：检测人类口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）和口腔正常黏膜组织中促血管生成素-1（Ang-1）和促血管生成素-2（Ang-2）蛋白及mRNA表达水平的差异，探讨Ang-1和Ang-2蛋白和基因表达在口腔鳞癌组织与正常口腔黏膜组织中蛋白表达的差异，并分析它们与患者临床病理学参数和肿瘤血管生成的关系。方法：收集四川省肿瘤医院头颈外科手术切除送检标本50例。其中OSCC标本35例，正常口腔黏膜组织l5例，所有标本均经病理证实。采用免疫组化和半定量RT-PCR检测Ang-1及Ang-2蛋白和mRNA表达水平；同时采用免疫组化检测口腔鳞癌标本中CD34表达并计数微血管密度。结果：Ang-2mRNA在OSCC组织和正常黏膜组织中均有表达，OSCC组织中Ang-2mRNA的表达显着高于正常黏膜组织（P<0.01），与黏膜下层浸润OSCC组织及正常黏膜组织比较，肌层浸润Ang-2mRNA表达更多，差异有统计学意义（P＜0.05）；Ang-1mRNA在OSCC组织和正常黏膜中表达均较弱或呈阴性，二者比较无统计学意义（P>0.05）。口腔鳞癌中的Ang-1蛋白表达明显下调而Ang-2蛋白明显上调。Ang-1，Ang-2蛋白在口腔鳞癌组织与正常口腔黏膜组织比较有显着性差异（P＜0.05）。Ang-2阳性表达的OSCC组织中MVD均值为48.10，阴性表达的OSCC组织中MVD均值为38.14，后者显着低于前者（t＝6.871，P＜0.05）。口腔鳞癌组织中微血管密度与口腔鳞癌病人年龄，性别，病理分级，临床分期，淋巴结转移之间分析，未见统计学差异（P＞0.05）。结论：Ang-1蛋白在正常口腔黏膜组织的表达高于口腔鳞癌组织；Ang-2蛋白在口腔鳞癌组织中的表达高于口腔正常黏膜组织；Ang-2mRNA在口腔鳞癌组织中的表达高于正常口腔黏膜；Ang-2的表达强度与口腔鳞癌的浸润深度有关，说明其在肿瘤恶性进展中可能起到重要的作用。Ang-2的表达与口腔鳞癌的微血管密度增加有关，Ang-2参与了OSCC的血管生成。口腔鳞癌的微血管密度与淋巴结转移及临床分期未见显着相关性，这点需要更大样本量做进一步研证。
徐萌,李五一,吴发印,陈新明[6]（2010）在《趋化因子受体CXCR4与口腔鳞癌微血管密度及临床病理的关系》文中提出目的:探讨趋化因子受体CXCR4与肿瘤微血管密度（MVD）及临床病理之间的关系。方法:通过流式细胞仪、免疫组化检测CXCR4在口腔鳞癌组织中的表达,计数CD34标记的肿瘤内微血管密度,分析CXCR4、MVD与口腔鳞癌大小、病理分级和淋巴结转移关系。结果:57例口腔鳞癌中,CXCR4阳性反应为32例,总体阳性率为56.1%,与肿瘤的大小、病理分级、淋巴结转移密切相关。CD34标记的肿瘤微血管在癌巢周缘的肿瘤间质中分布密集,而在远离癌巢的间质中呈散在分布。MVD均值为22.386±8.974。MVD与口腔鳞癌大小、病理分级和淋巴结转移密切相关。Spearman秩相关分析表明,口腔鳞癌中CXCR4的表达与MVD表达呈显着正相关（rs=0.334,P<0.05）。结论:CXCR4可能直接或间接参与肿瘤血管新生,进而促进口腔鳞癌的转移。
陈思秀,李小玉,孔祥丽,冯云[7]（2010）在《口腔鳞状细胞癌中血管内皮生长因子-C的表达及其与血管、淋巴管生成、淋巴结转移的关系》文中指出目的探讨血管内皮生长因子-C（VEGF-C）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中的表达情况及其与血管、淋巴管生成、淋巴结转移之间的关系。方法调查拥有完整临床病理资料的67例口腔鳞癌患者的手术切除标本,采用SP免疫组化技术检测VEGF-C的表达情况并分析其与微血管密度（MVD）、淋巴管密度（LVD）及其他临床病理指标的关系。结果晚期病例、淋巴结转移阳性病例的VEGF-C表达明显升高（P值分别为0.015和<0.001）,而VEGF-C表达与患者性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度无关（P>0.05）。VEGF-C高表达组的LVD明显高于VEGF-C低表达组（P=0.001）,但两组间MVD无统计学差异（P=0.125）。此外,淋巴结转移阳性组的LVD明显高于淋巴结转移阴性组（P=0.026）。结论 VEGF-C可能主要通过参与诱导口腔鳞癌淋巴管生成促进淋巴结转移。
李超,张兵,王朝晖,陈建超,李彬,王少新,陈锦,李春华,王薇,宋宇峰[8]（2009）在《口腔鳞癌中促血管生成素1及2表达的逆转及意义》文中指出目的探讨口腔鳞癌中促血管生成素1及2（angiopoietin,Ang-1,Ang-2）的表达及其与肿瘤血管生成、血管成熟和口腔鳞癌进展及预后的关系。方法常规免疫组织化学方法检测62例口腔鳞癌及30例癌旁正常组织和10例正常口腔黏膜中Ang-1、Ang-2、血管内皮生长因子（VEGF）、白细胞分化抗原34（cluster of differentiation,CD34）及α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）的表达;双染免疫组织化学法同时染CD34标记的血管内皮细胞和α-SMA标记的血管壁细胞（包括血管平滑肌细胞和周细胞）,评估微血管密度及血管成熟指数;应用BioMias图像处理系统处理图像。结果口腔鳞癌中Ang-1及Ang-2的蛋白表达比（Ang-1/Ang-2）显着低于癌旁正常组织和正常口腔黏膜（t值分别为-5.421和-6.234,P值均<0.01）;有无肿瘤淋巴结转移、微血管密度和血管成熟指数的不同分组中,Ang-1/Ang-2的差异均有统计学意义（t值分别为3.421、-3.221和3.824,P值均<0.01）。Ang-1/Ang-2低比值、高VEGF蛋白表达的患者微血管密度显着高于其他表达状态（t值分别为2.055、2.345和2.985,P值均<0.05）。Kaplan-Meier法统计62例口腔鳞癌患者5年生存率为0.641,Ang-1/Ang-2高比值（>0.51）组较低比值（<0.51）组生存率高,分别为0.741和0.534,Logrank检验差异无统计学意义（X2=3.383,P=0.066）。结论口腔鳞癌组织中Ang-1及Ang-2表达的逆转可能在肿瘤的发生、发展中起重要作用,它与口腔鳞癌的微血管生成、血管成熟及预后有关。
李青川[9]（2009）在《VEGF-D、VEGFR-3在舌鳞癌淋巴转移中作用的研究》文中提出背景:舌鳞癌是口腔颌面部常见的恶性肿瘤。临床上具有生长快、浸润性强、有较高的复发率、淋巴转移率高、预后较差等特点。其在口腔鳞状细胞癌中构成比最高,我国约占32.3%,欧美国家报道在21%-52%之间。舌鳞癌为上皮源性肿瘤,具有较高的区域性淋巴转移率,颈部区域淋巴结的转移高达38.07%。研究表明在其仍为原位癌时,在许多正负调控因子的相互作用下就开始了新生脉管的形成,供应肿瘤生长所必需的氧气和营养物质。但至今舌鳞癌诱导淋巴管生成的分子机制,以及其新生淋巴管与淋巴道转移间的确切关系尚不甚明确。淋巴内皮生长因子-D（VEGF-D）是血管内皮生长因子（VEGF）家族的一个成员,是近年来新发现的促淋巴管生长因子。VEGF-D在人类肿瘤中的表达及其意义研究结果不尽一致。VEGF-D必须和相应的受体结合才能发挥其促进微淋巴管生成的作用,VEGF-D/VEGFR-3与肿瘤淋巴道转移的关系,特别是在舌鳞癌中的作用尚待证实。以往对肿瘤淋巴管生成的研究因为缺乏淋巴管内皮细胞特异性标记物,仅依靠普通的HE染色技术很难将它们在形态学上与毛细血管截然区分,因此对肿瘤新生淋巴管生成的研究远远滞后于对肿瘤新生血管生成的研究。近年来,虽然淋巴管内皮透明质酸受体（LYVE-1）等一些淋巴管内皮细胞标记物陆续被发现,但多项研究证实这些常用标记物不仅在淋巴管内皮细胞中表达,而且在血管内皮细胞中也有表达,影响了在形态学上对肿瘤微淋巴管和肿瘤微血管的区分。1999年Marks等发现的D2-40分子,是一种可以和胚胎睾丸细胞膜及干细胞膜表面的癌胚抗原M2A（一种分子量为40KD的0链唾液酸糖蛋白）发生特异性免疫反应的单克隆抗体。最新的研究发现D2—40在淋巴管内皮细胞上有固定的抗原决定簇,可以用来标识恶性黑色素瘤、前列腺癌、胃癌、肾细胞癌等多种肿瘤的新生微淋巴管,在有管壁平滑肌的成熟淋巴管和微血管内皮上没有表达,因此成为一种新的淋巴管内皮特异性标记物。目的:探讨舌鳞癌组织中VEGF-D（淋巴管内皮生长因子-D）及其受体VEGFR-3（血管内皮生长因子受体-3）的表达。采用D2—40标记舌鳞癌组织中的淋巴管并计数肿瘤淋巴管密度（LVD）。分析VEGF-D、VEGFR-3与舌鳞癌中淋巴管生成、分布、密度及相关临床病理因素之间的关系。推断VEGF-D/VEGFR-3/LVD在舌鳞癌淋巴转移中的作用。材料和方法标本来源,实验组为2005～2006年郑州大学第一附属医院口腔颌面外科舌鳞癌患者术后标本69例（所有患者均术前未行放疗和化疗,术后正规治疗）;对照组为正常舌黏膜组织标本20例。所取组织均经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,进行组织病理学检查。采用免疫组织化学法,检测舌鳞癌患者手术切除标本中VEGF-D、VEGFR-3和D2-40的表达情况。统计方法:采用SPSS13.0统计软件进行数据处理,α=0.05。其中VEGF-D和VEGFR-3的表达以及与临床病理参数之间的关系采用卡方检验,LVD与VEGF-D、VEGFR-3的表达以及与临床病理参数之间的关系采用t检验及F检验。结果:1、VEGF-D的免疫组化结果:正常舌黏膜存在少量VEGF-D表达,主要位于上皮细胞胞浆。阳性3例（阳性率为15.00%）。舌鳞癌组织中VEGF-D表达主要位于肿瘤细胞的胞浆。阳性30例（阳性率为43.48%）,与对照组相比有显着性差异（P＜0.05）。37例淋巴结转移组中,VEGF-D阳性22例（阳性率59.46%）,32例无淋巴结转移组中VEGF-D阳性8例（阳性率25.00%）,二者差异显着（P＜0.05）。VEGF-D的表达与年龄、肿瘤大小、病理分型无关（P＞0.05）。2、VEGFR-3的免疫组化结果:VEGFR-3在正常组织中有4例表达阳性（阳性率为20.00%）。舌鳞癌中VEGFR-3表达位于肿瘤周围淋巴管内皮细胞,在肿瘤细胞胞浆中也有阳性表达,但其在肿瘤组织的表达主要集中在肿瘤外周。在舌鳞癌中有44例呈阳性表达（阳性率为63.77%）。37例淋巴结转移组中,VEGFR-3阳性30例（阳性率81.08%）,32例无淋巴结转移组中VEGFR-3阳性14例（阳性率43.75%）,二者差异显着（P＜0.05）。肿瘤细胞VEGFR—3的阳性表达和VEGF-D阳性表达之间有显着的相关性（P＜0.05）。与淋巴转移也具有显着相关性。3、D2-40的免疫组化结果:正常黏膜的D2-40阳性染色的淋巴管很少且散在分布,计数微淋巴管密度值为6.23±0.23。光镜下见舌鳞癌组织中D2-40阳性染色的淋巴管大部分位于肿瘤间质组织内,在肿瘤组织内部也有少量淋巴管。特征为管壁薄,管腔大小不一,形态不规则,舌鳞癌中淋巴管密度为33.24±0.09。两者差异显着（P＜0.05）。非淋巴结转移组淋巴管密度为27.56±0.05。淋巴结转移组淋巴管密度为38.15±0.35。两者差异显着（P＜0.05）。结论:1、VEGF-D在正常组织中低表达,在舌鳞癌中高表达,与淋巴结转移相关。与年龄、肿瘤大小、病理分型无关。2、VEGFR-3在正常组织或舌鳞癌组织中都有表达,但在舌鳞癌中高表达。其高表达和肿瘤细胞中VEGF-D的阳性表达有显着的相关性（P＜0.05）,和淋巴结转移也具有显着的相关性（P＜0.05）。3、正常舌黏膜组织和舌鳞状细胞癌组织中均可见D2-40阳性表达的淋巴管,但舌鳞状细胞癌组织中淋巴管密度明显高于正常黏膜组织。说明舌鳞状细胞癌组织中具有更丰富的淋巴管,但分布存在异质性。淋巴管主要分布于肿瘤间质组织内、管壁薄、管腔大小不一、形态不规则。肿瘤淋巴管密度（LVD）与淋巴结转移等相关,其LVD的增加可能与舌癌的侵袭及转移相关。4、由以上可以推测,VEGF-D/VEGFR-3可促进肿瘤淋巴管生成,是肿瘤经淋巴道侵袭转移的重要调控系统之一,淋巴管数目的增多使癌细胞更易于侵入淋巴管从而促进淋巴结转移,导致生存期缩短。舌鳞癌组织中的VEGF-D/VEGFR-3/LVD联合检测可作为评估舌鳞癌淋巴结转移的一项辅助指标,并为舌癌患者判断预后及确定临床治疗方案提供实验和理论依据。
岳金[10]（2009）在《VEGF-C、PDGF-A和SPARC在口腔鳞状细胞癌中表达的研究》文中指出目的:采用高通量微阵列技术筛选肿瘤差异性表达基因是目前肿瘤分子生物学研究的热点,VEGF-C、PDGF-A、SPARC是通过该技术筛选出的口腔鳞癌相关基因。本课题进一步研究其在口腔鳞状细胞癌和癌旁正常口腔粘膜中的表达及其与临床病理因素间的关系,验证VEGF-C、PDGF-A、SPARC与口腔鳞癌的相关性,为口腔鳞状细胞癌的防治提供新的靶点。方法:对60例口腔鳞癌标本的癌旁正常组织和癌组织中VEGF-C、PDGF-A及SPARC的表达用免疫组织化学通用型两步法进行检测,计算机图像分析得出平均吸光度值并进行统计学分析,Spearman相关分析研究三者表达与性别、年龄、生长部位、肿瘤T分期、病理分级、区域淋巴结转移、临床分期等临床病理因素间的关系。结果:1.口腔鳞癌中VEGF-C的表达明显高于癌旁正常组织（u=7.747,P<0.01）。VEGF-C的表达与临床分期（r=0.564,P<0.05）及区域淋巴结转移（r=0.706,P<0.01）有明显的正相关性,与性别、年龄、生长部位、肿瘤T分期、病理分级无明显的相关性。2.口腔鳞癌中PDGF-A的表达明显高于癌旁正常组织（u=6.982,P<0.01）。PDGF-A的表达与肿瘤病理分级（r=0.286,P<0.05）、区域淋巴结转移（r=0.314,P<0.05）有相关性,与口腔鳞癌的性别、年龄、T分期、生长部位、临床分期无明显的相关性。3.口腔鳞癌中SPARC的表达明显高于癌旁正常组织（u=8.427,P<0.01）。SPARC的表达与口腔鳞癌的生长部位、T分期、病理分级无明显的相关性,与临床分期（r=0.375,P<0.01）、淋巴结转移（r=0.495,P<0.01）有明显的正相关性。4.口腔鳞癌组织中SPARC与VEGF-C及PDGF-A的表达有明显相关性（r=0.570,0.501,P<0.01）;VEGF-C与PDGF-A的表达无明显相关性（r=0.201,P>0.05）;结论:1.VEGF-C、PDGF-A、SPARC在口腔鳞癌中高表达,是口腔鳞癌的相关基因。2.VEGF-C、PDGF-A、SPARC与口腔鳞癌区域淋巴结转移有相关性,可作为淋巴结转移的预测指标之一3.SPARC与VEGF-C及PDGF-A在口腔鳞癌表达有明显相关性,其相互作用机制还有待深入研究。4.VEGF-C、SPARC和PDGF-A可能成为口腔鳞癌基因治疗的新靶点。
二、口腔鳞癌中VEGF表达和微血管密度及与临床病理、预后关系的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、口腔鳞癌中VEGF表达和微血管密度及与临床病理、预后关系的研究（论文提纲范文）
（1）CD68+CAFs调控Tregs细胞募集影响口腔鳞癌进程的研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 参考文献 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 绪论 |
| 1.口腔鳞状细胞癌的发病现状及预后 |
| 2.肿瘤相关成纤维细胞概述 |
| 3.肿瘤相关成纤维细胞与口腔鳞癌 |
| 4.肿瘤相关成纤维细胞与肿瘤免疫 |
| 5.肿瘤相关成纤维细胞的异质性 |
| 6.CD68与肿瘤相关成纤维细胞 |
| 7.本研究的主要内容 |
| 参考文献 |
| 第一章 CD68~+CAFs在口腔鳞癌中的分布及意义 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| 1.实验材料、实验试剂及仪器 |
| 2.实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 3.1 原代CAFs及NFs的提取及表型鉴定 |
| 3.2 验证CD68在CAFs中的高表达 |
| 3.3 CD68 在正常粘膜、异常增生粘膜及原位癌中CAFs的表达情况 |
| 3.4 OSCC中CD68~+CAFs在肿瘤不同区域的分布情况 |
| 3.5 CD68~+CAFs的表达水平与OSCC患者临床病理参数的关系 |
| 3.6 CD68~+CAFs表达与OSCC患者预后的相关性 |
| 3.7 CD68~+CAFs表达在OSCC中独立预后分析 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 CD68~+CAFs对肿瘤细胞增殖、迁移和Tregs细胞募集的影响 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| 1.实验材料、实验试剂及仪器 |
| 2.实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 3.1 CD68的表达水平改变后CAFs表型相关标志物的表达 |
| 3.2 成纤维细胞中CD68表达水平对OSCC细胞增殖功能的影响 |
| 3.3 成纤维细胞中CD68表达水平对OSCC细胞迁移功能的影响 |
| 3.4 CAFs干扰CD68对Tregs募集的直接作用 |
| 3.5 CAFs干扰CD68对Tregs募集的间接影响 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 CD68~+CAFs调控Tregs细胞募集的机制研究 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| 1.实验材料、实验试剂及仪器 |
| 2.实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 3.1 临床样本验证CD68~+ CAFs低的患者伴随更高的Tregs浸润 |
| 3.2 CAFs干扰CD68激活JAK2-STAT3通路增强CAFs细胞因子表达 |
| 3.3 抑制CD68~+CAFs中JAK2-STAT3信号通路能够下调CCL2、IL-1β分泌 |
| 3.4 CAFs干扰CD68通过激活转录因子STAT3促进肿瘤细胞募集Tregs |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 博士期间主要科研成果 |
（2）HLA-DR调控巨噬细胞在哈萨克族食管癌浸润转移中作用与机制的初步研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分: 巨噬细胞在哈族食管鳞癌组织中的分布特征及临床病理学意义 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 1.1 石蜡组织样本 |
| 1.2 主要试剂与仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 组织芯片制备技术 |
| 2.2 临床病理组织学观察、分型及临床分期 |
| 2.3 免疫组织化学方法 |
| 2.4 免疫组化检测结果判定 |
| 2.5 统计学方法 |
| 结果 |
| 1. 哈族食管鳞癌的临床病理资料特点 |
| 2. 哈族食管鳞癌组织和癌旁正常组织中M1和M2型巨噬细胞分布特征 |
| 3. 哈族食管鳞癌组织中M1和M2型巨噬细胞的分布与食管鳞癌患者临床病理特征的关系 |
| 4. 哈族食管鳞癌组织HLA-DR的表达及其与临床病理特征的相关性 |
| 5. 哈族食管鳞癌VEGF、MMP-9表达和微血管、淋巴管分布与临床病理特征的相关性 |
| 6. M2型巨噬细胞、M2/M1比值、VEGF、MMP-9蛋白表达、MVD、LVD之间的相关性 |
| 7. 哈族食管鳞癌组织中M1和M2型巨噬细胞的分布与食管鳞癌患者预后的关系 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分: HLA-DR介导巨噬细胞对食管癌细胞生物学行为的影响及作用机制初探 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 1.1 食管鳞癌和单核细胞系 |
| 1.2 主要试剂与仪器 |
| 1.3 shRNA慢病毒设计合成 |
| 2. 方法 |
| 2.1 细胞培养、传代及冻存 |
| 2.2 巨噬细胞的诱导 |
| 2.3 THP-1来源巨噬细胞与食管鳞癌细胞共培养 |
| 2.4 共培养体系条件培养基的制备 |
| 2.5 食管鳞癌细胞形态观察 |
| 2.6 CCK8细胞增殖实验 |
| 2.7 克隆形成实验 |
| 2.8 细胞免疫荧光实验 |
| 2.9 免疫荧光双染实验 |
| 2.10 体外细胞迁移、侵袭实验 |
| 2.11 实时定量PCR实验 |
| 2.12 蛋白免疫印迹 |
| 2.13 慢病毒shRNA转染巨噬细胞 |
| 2.14 统计学方法 |
| 结果 |
| 1. THP-1来源巨噬细胞与食管鳞癌细胞共培养前后两种细胞形态和表型的改变 |
| 2. 共培养体系巨噬细胞对食管鳞癌细胞生物学行为的影响 |
| 3. 共培养体系巨噬细胞对产生的促食管鳞癌的侵袭转移相关基因表达的影响 |
| 4. 下调HLA-DR对巨噬细胞表型及食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 |
| 5. 下调HLA-DR的巨噬细胞在共培养体系对促食管鳞癌的侵袭转移相关基因表达的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 肿瘤相关巨噬细胞促进肿瘤侵袭转移研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩略词一览表 |
| 博士在读期间研究成果 |
| 致谢 |
（3）COX-2和SPARC在口腔鳞癌中表达的研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 标本收集与标本库的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 COX-2 与SPARC在口腔鳞状细胞癌中的表达与临床病理特征的相关性研究 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 主要材料 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 1.4 实验耗材 |
| 1.5 实验用主要试剂的配置 |
| 1.6 实验用器械的处理 |
| 1.7 实验方法 |
| 1.8 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1 免疫组化检测结果 |
| 2.2 实时荧光定量 PCR 检测结果 |
| 2.3 Western Blot 检测结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三部分 口腔鳞状细胞癌中COX-2、SPARC的DNA甲基化修饰研究 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文 |
（4）COX-2、MMP-7在口腔鳞癌中的表达及对微血管密度的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1.主要材料与试剂 |
| 2.实验方法 |
| 结果 |
| 1.COX-2、MMP-7、MVD 在 OSCC 中及癌旁正常口腔粘膜组织中的表达 |
| 2.COX-2、MMP-7 表达及 MVD 与 OSCC 临床基线特征及病理特征关系 |
| 3.COX-2 和 MMP-7 表达与 MVD 值的相关性分析 |
| 4.在 OSCC 组织中，COX-2 和 MMP-7 表达相关性分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（5）口腔鳞癌组织中Angiopoietin-1、Angiopoietin-2 mRNA表达及其临床意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 致谢 |
| 口腔鳞癌中 Angiopoietin 的表达及功能的研究进展（综述 1） |
| 参考文献 |
| RNA 干扰在 Angiopoietin/Tie 功能研究的进展（综述 2） |
| 参考文献 |
（9）VEGF-D、VEGFR-3在舌鳞癌淋巴转移中作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 正文部分 VEGF-D、VEGFR-3在舌鳞癌淋巴转移中作用的研究 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述部分 VEGF家族在口腔鳞癌淋巴转移中的作用研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
（10）VEGF-C、PDGF-A和SPARC在口腔鳞状细胞癌中表达的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1.1 病例选择 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 1.4 主要试剂配制 |
| 1.5 免疫组织化学染色 |
| 1.6 结果判断 |
| 1.7 图像分析 |
| 1.8 统计学处理 |
| 第二章 结果 |
| 第三章 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 综述一 VEGF-C与肿瘤转移研究 |
| 参考文献 |
| 综述二 SPARC与肿瘤关系研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
四、口腔鳞癌中VEGF表达和微血管密度及与临床病理、预后关系的研究（论文参考文献）
- [1]CD68+CAFs调控Tregs细胞募集影响口腔鳞癌进程的研究[D]. 赵星星. 南京大学, 2020
- [2]HLA-DR调控巨噬细胞在哈萨克族食管癌浸润转移中作用与机制的初步研究[D]. 胡建明. 华中科技大学, 2017(10)
- [3]COX-2和SPARC在口腔鳞癌中表达的研究[D]. 吴训. 广西医科大学, 2016(11)
- [4]COX-2、MMP-7在口腔鳞癌中的表达及对微血管密度的影响[D]. 庞静. 大连医科大学, 2013(05)
- [5]口腔鳞癌组织中Angiopoietin-1、Angiopoietin-2 mRNA表达及其临床意义[D]. 梁博. 泸州医学院, 2012(02)
- [6]趋化因子受体CXCR4与口腔鳞癌微血管密度及临床病理的关系[J]. 徐萌,李五一,吴发印,陈新明. 实用口腔医学杂志, 2010(04)
- [7]口腔鳞状细胞癌中血管内皮生长因子-C的表达及其与血管、淋巴管生成、淋巴结转移的关系[J]. 陈思秀,李小玉,孔祥丽,冯云. 华西口腔医学杂志, 2010(03)
- [8]口腔鳞癌中促血管生成素1及2表达的逆转及意义[J]. 李超,张兵,王朝晖,陈建超,李彬,王少新,陈锦,李春华,王薇,宋宇峰. 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2009(05)
- [9]VEGF-D、VEGFR-3在舌鳞癌淋巴转移中作用的研究[D]. 李青川. 郑州大学, 2009(03)
- [10]VEGF-C、PDGF-A和SPARC在口腔鳞状细胞癌中表达的研究[D]. 岳金. 青岛大学, 2009(11)