微管去稳定剂oncoprotein18/stathmin基因在深Ⅱ度烧伤愈合前创面和增生性瘢痕中的表达

一、微管失稳剂oncoprotein18/stathmin基因在深Ⅱ度烧伤愈合前创面及增生性瘢痕中的表达（论文文献综述）

王潇^[1]（2007）在《微管不稳定蛋白Stathmin在食管鳞癌组织中的表达及意义》文中进行了进一步梳理食管癌是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤，占所有恶性肿瘤的2％。全世界每年约有10万人死于食管癌。我国是食管癌高发区，因食管癌死亡仅次于胃癌，居第二位。食管癌的发生与亚硝胺慢性刺激、炎症与创伤、遗传因素以及饮水、粮食和蔬菜中的微量元素有关，但确切原因不甚明了。微管不稳定蛋白Stathmin，又称op18、p19、p18、19k、Metablastin、oncoprotein18，是一种高度保守的细胞内可溶性磷酸蛋白质，其命名来自于希腊语stathmos。Stathmin可与多种细胞因子、癌基因、抑癌基因的表达产物直接或间接作用，并通过在细胞分裂周期中起关键作用的微管蛋白、微管及纺锤体，控制细胞周期，并以次改变细胞的增殖、分化，在细胞转导途径中起重要作用，因此亦被学术界称为信号转导中继站（relay）。Stathmin作为细胞信号转导分子在细胞分化、组织再生、修复及发育中，尤其是恶性肿瘤发生、发展及决定表型上有重要作用及意义。Stathmin在多种恶性肿瘤中都存在高表达。已有研究表明，Stathmin的高水平表达对于维持肿瘤细胞的高增殖率是必需的，Stathmin基因及其表达产物是一个极具吸引力的恶性肿瘤药物及生物治疗的新靶点，是估计患者预后的新指标。食管癌最常见的病理类型是鳞状细胞癌。本实验应用免疫组织化学法检测食管鳞癌组织及癌旁食管黏膜和食管癌细胞株EC9706细胞中Stathmin蛋白的表达情况，探讨Stathmin蛋白在食管鳞癌组织中表达的意义。材料与方法1)收集新乡医学院2006年4月至9月期间食管鳞癌切除标本31例，所取的上述新鲜标本立即放入4％多聚甲醛溶液中固定，石蜡包埋，除做常规病理检查外，留待以后免疫组化。2)应用免疫组织化学法检测食管鳞癌组织及癌旁食管黏膜中Stathmin的表达。3)选用食管癌细胞株EC9706常规培养，应用免疫组织化学法检测其中Stathmin的表达。4)实验数据经SPSS10.0统计软件处理，采用方差分析，以α=0.05为方差显着性标准。结果1) 31例食管鳞癌标本中，Stathmin表达阳性的标本为23例，阳性率为80.6％。2) 31例相应癌旁黏膜中，Stathmin表达阳性的标本为10例，阳性率为32.3％。3)将31例食管鳞癌组织标本分别按年龄、性别、组织类型、分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期分组，Stathmin表达差异有统计学意义的因素有分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期。4)在EC9706细胞胞浆中可见Stathmin蛋白阳性表达。结论1)食管癌组织中，Stathmin蛋白高表达。2)食管癌组织中，Stathmin蛋白高表达与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期显着相关。

姚庆君,胡大海,陈璧,徐明达,董茂龙,贾赤宇,王树森^[2]（2005）在《人微管蛋白失稳剂Oncoprotein18原核表达载体的构建及表达》文中研究表明目的:原核表达人Oncoprotein18（Op18）蛋白,为 制备抗Op18的mAb作准备.方法:从人皮肤组织中用RT PCR扩增Op18cDNA的全长编码序列,克隆入表达载体pR SETA中,构建Op18的高表达工程菌,并以IPTG诱导表达目 的蛋白,通过亲和层析法纯化表达的Op18融合蛋白.结果: 酶切及测序鉴定证明,获得含有目的基因片段的重组质粒,表 达的Op18融合蛋白以可溶性的形式存在.结论:所获Op18 融合蛋白以可溶性的形式存在,为制备其mAb及进一步研究 Op18在创伤愈合及瘢痕形成中的作用打下了基础.

姚庆君^[3]（2004）在《细胞增殖负性因子p16和Op18在烧伤愈合及疤痕形成中作用及机理》文中指出瘢痕过度增生（又称病理性瘢痕，包括增生性瘢痕及瘢痕疙瘩）是人类创伤愈合特有的现象，多种细胞参与了创伤愈合过程，而成纤维细胞生物学行为异常尤其是增殖活性异常是瘢痕过度形成的重要原因，成纤维细胞的异常增生使增生性的瘢痕组织中胶原过度沉积、排列紊乱，导致愈后不同程度的畸形与功能障碍。虽然多种内外因素影响创伤愈合的结局及疤痕增生的程度，但除外科手段外，目前仍缺乏有效防治瘢痕增生的方法。近年来尽管有关创伤愈合与瘢痕形成的研究很多，但有关创伤愈合及瘢痕形成的相关理论并无突破性进展，创伤愈合及瘢痕形成中的一些基本问题仍然困扰着临床医师：加速创伤愈合的各种基因工程产品会不会使瘢痕过度增生?除外科手术外其它防治瘢痕的方法介入的时机是否适当?如用药物尽早介入干预瘢痕增生可行吗?如何实现加速创伤愈合与防止瘢痕增生的统一?促进创伤愈合与抑制瘢痕增生对成纤维细胞的增殖来说如同钱币的正反面，正负调控相对平衡与制约使成纤维细胞增殖有度可能是理想的创伤愈合模式。目前为止，尚缺乏在创伤愈合及瘢痕形成中有关负性调控机制的研究。 随着细胞生物学与分子生物学的发展，基因与疾病的关系不断被揭示。基因遗传与疾病发生、易感、药物敏感性有着必然联系，在疾病的不同时期、不同条件基因存在差异表达，瘢痕过度增生作为人类特有的疾病必然存在特有的基因表达，基因表达图谱及图谱中单个基因表达不断变化，构成了创伤愈合及瘢痕形成过程中复杂的、网络化的、相对平衡的调控机制。瘢痕过度增生的发生，本质上是成纤维细胞的调控机制出现了失衡。近年来研究证明，肿瘤发生正是由于调控机制异常导致了肿瘤细胞生长失控，这使得与肿瘤在结构上相似、成纤维细胞在增殖上阶段性相似的瘢痕研究得到启示，两者发生的机制和机理有可能相同或部分相同，把肿 第四军医大学博士学位论文瘤调控机制的研究运用在瘫痕过度增生的研究中更有可行性。而肿瘤主要由于负性调控机制异常特别是抑癌基因p16异常所致，初步研究表明，在瘫痕过度增生的组织中亦存在抑癌基因的异常，而负性调控无论对创伤愈合基础理论还是临床治疗都具有迫切性与现实性，因此，抑癌基因P16的研究成为本实验的重点。 在肿瘤中抑癌基因P16主要是发生缺失、突变与甲基化修饰程度增高:基因全部缺失，无P16蛋白产生;部分缺失或发生突变，可以产生无功能或功能不全的P16蛋白;基因的甲基化修饰程度越高，p16基因的表达越低，产生的P16蛋白越少。基因的缺失可以通过基因组PCR发现，突变可以经过PCR一单链构象多态性分析来检测（PCR一SSCP），甲基化修饰程度可以通过特定的甲基化PCR（MS一PCR）确定，RT一PCR及western blot分别测定基因与蛋白的表达。获取人深n“烧伤后创伤愈合早期到后期不同时间的增生性瘫痕组织标本，动态观察了上述情况，并对不同状态疲痕组织标本（稳定瘫痕、瘫痕疙瘩、褥疮周围瘫痕）进行了观察。 皮肤移植能有效防止瘫痕增生，但修复时间早晚及皮片厚度与瘫痕增生程度密切相关。皮肤移植后成纤维细胞的增殖发生了改变，皮肤移植可能改变了成纤维细胞负性调控机制，证明皮肤移植后负性调控变化有助于理解负性调控在瘫痕过度增生中的作用。为此，设计了观察不同时间、不同厚度（刃厚、全厚）皮片移植对负性调控因子的影响，但在临床取得有时间规律的全厚皮片移植标本存在一定困难，有必要建立稳定的动物烫伤模型及烫伤后皮肤移植模型来获取标本，经过实验摸索，确立了大鼠的烫伤模型及烫伤后皮肤移植模型。以往的研究表明，负性调控因子p53、P21参与了大鼠的创伤愈合，为少走弯路，应用RT一PCR及western blot分别测定这两种基因从基因到蛋白的表达。 理解负性调控机制的作用，更重要的是为细胞增殖的负性干预打基础。探索抑制成纤维细胞增殖的多种途径，可以联合应用来增强抑制作用，也可避免走入崎途。癌基因蛋白18（oncoProteinls，0P18）可以干扰有丝分裂中的微丝微管形成，可比作生物体内的秋水仙素，研究其在创伤愈合及瘫痕形成中的作用，为开发相对安全、有效的OP18重组蛋白做基础工作。应用RT一PCR方法动态观察了Op18在创伤愈合及瘫痕形成中的基因表达。为进一步了解细胞增殖正负调控之间可能存在的平衡与制约关系， 第四军医大学博士学位论文在人与动物标本中动态观察了正性调控因子cyClinDI的基因与蛋白表达。 主要结果如下:（l）制作了一种蒸汽烫伤装置，建立了一种大鼠烫伤模型，使大鼠的烫 伤深度与面积可控，压力为0.12 mPa的蒸汽致伤大鼠，烫伤3秒、 5秒、8秒时分别为浅11“、深11“、1110烫伤模型，使用的2.6 em 烫伤孔相当于2509大鼠体表面积的1%。（2）制作了大鼠深n”烫伤后的刃厚及全厚皮肤移植模型。（3）观察到在大鼠的皮片移植后的创伤愈合中:p53、pZI从基因到蛋 白表达出现了从低到高的过程，Cyclin Dl蛋白表达是先高后低的 过程;伤后皮片不同时间（伤后即刻、伤后1周、伤后2周）移植

姚庆君,贾赤宇,陈璧,卢宁,徐明达,刘新平,药立波,王树森^[4]（2003）在《微管失稳剂oncoprotein18/stathmin基因在深Ⅱ度烧伤愈合前创面及增生性瘢痕中的表达》文中研究说明目的 观察深Ⅱ度烧伤创面愈合前及愈合后增生性瘢痕组织中微管失稳剂oncopro tein18 stathmin（Op18）基因的表达。 方法 提取临床深Ⅱ度烧伤愈合前与愈合后不同时期增生性瘢痕中的总RNA,以GADPH基因表达为内参照 ,采用逆转录酶 多聚酶链式反应 （RT PCR）方法 ,半定量检测上述基因表达水平。 结果 与正常组织比较 ,伤口愈合前Op18基因表达显着降低 （P <0.0 5 ）,愈合后表达迅速增高 （P <0.0 5 ）,在 4～ 32个月增生性瘢痕中Op18基因稳定高表达。 结论 在伤后早期Op18基因的表达水平降低与细胞增殖、组织修复的需要相适应 ,在增生性瘢痕组织中通过Op18基因高表达来抑制瘢痕增生

二、微管失稳剂oncoprotein18/stathmin基因在深Ⅱ度烧伤愈合前创面及增生性瘢痕中的表达（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、微管失稳剂oncoprotein18/stathmin基因在深Ⅱ度烧伤愈合前创面及增生性瘢痕中的表达（论文提纲范文）

（1）微管不稳定蛋白Stathmin在食管鳞癌组织中的表达及意义（论文提纲范文）

（2）人微管蛋白失稳剂Oncoprotein18原核表达载体的构建及表达（论文提纲范文）

（3）细胞增殖负性因子p16和Op18在烧伤愈合及疤痕形成中作用及机理（论文提纲范文）

四、微管失稳剂oncoprotein18/stathmin基因在深Ⅱ度烧伤愈合前创面及增生性瘢痕中的表达（论文参考文献）

• [1]微管不稳定蛋白Stathmin在食管鳞癌组织中的表达及意义[D]. 王潇. 郑州大学, 2007(04)
• [2]人微管蛋白失稳剂Oncoprotein18原核表达载体的构建及表达[J]. 姚庆君,胡大海,陈璧,徐明达,董茂龙,贾赤宇,王树森. 第四军医大学学报, 2005(03)
• [3]细胞增殖负性因子p16和Op18在烧伤愈合及疤痕形成中作用及机理[D]. 姚庆君. 第四军医大学, 2004(04)
• [4]微管失稳剂oncoprotein18/stathmin基因在深Ⅱ度烧伤愈合前创面及增生性瘢痕中的表达[J]. 姚庆君,贾赤宇,陈璧,卢宁,徐明达,刘新平,药立波,王树森. 中华烧伤杂志, 2003(S1)

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