一、心肌钙蛋白Ⅰ的物种同源性（论文文献综述）
林源[1]（2010）在《先天性室间隔缺损患者GATA4基因突变研究及封堵术后心脏结构和功能变化的随访研究》文中指出目的对20例散发室间隔缺损（ventricular septal defect,VSD）患者的心肌组织及外周血液DNA进行GATA4基因突变检测,分析其分子遗传学特征。方法提取20例VSD患者心肌组织和外周血细胞DNA样本,设计17对引物进行PCR（polymerase chain reaction,多聚核苷酸聚合酶链式反应）扩增GATA4基因7对外显子,并采用双脱氧链终止法直接测序。结果心肌组织和外周血细胞DNA样本中GATA4基因突变位点均对应一致,共发现2个错义突变及1个无义突变,其中外显子3和外显子6部分发现两个新的错义突变位点I255S、P334T。另外,外显子7部分发现一个新的无义突变位点,在氨基酸非编码区,生物信息学分析目前未发现其有功能的改变。结论VSD存在GATA4基因新的突变,其在组织和血液中突变一致,为非体细胞镶嵌突变。外显子7部分新的突变位点,有待进一步生物信息学分析其功能。目的应用经胸超声心动图评价室间隔缺损（VSD）封堵术后心脏结构、功能和血流动力学的变化,以评估疗效和术后恢复情况。方法38例成功施行经皮穿刺VSD封堵术的患者术前、术后1周、1月及1年分别进行超声心动图检查,常规测量左心房内径（LAD）、左心室舒张末及收缩末内径（LVDd/LVDs）、左室射血分数（LVEF）、左室流出道血流速度（VLOVT）、二尖瓣口舒张期血流峰值速度（Em/Am）;组织多普勒成像测量心室壁收缩期最大位移（Ds）、收缩期峰值速度（Vs）及二尖瓣环舒张早期及舒张晚期峰值速度（E’/A’）,并计算E’/A’、Em/ E’。结果VSD封堵术后早期,LAD、LVDd较术前明显缩小,VLOVT明显加快,统计学均有意义（P均<0.05）,而EF无明显统计学差异（P>0.05）;Ds及Vs明显减小（P<0.05）,受损升高的左心室舒张功能指标Em/E’有所下降,但尚无统计学意义（P>0.05）;术后1年,Em/E’下降至正常水平,VLOVT下降至术前水平,均有统计学意义（P均<0.05）.结论经皮穿刺VSD封堵术早期可纠正VSD患者左心容量负荷过重导致的血流动力学紊乱和心脏结构异常;中期可改善受损的左室舒张功能;超声心动图对VSD封堵前后心脏功能变化的评估起了重要的作用。
时丽丽[2]（2008）在《cTnI特殊位点抗原的重复表达、免疫及其抗体效价检测》文中指出心肌肌钙蛋白I（cTnI）为心脏所独有,在发病后出现时间早,敏感度高,特异性好,持续时间长,已被认为是诊断心肌损伤,尤其是急性心肌梗塞（acute myocardial infarction,AMI）的金指标。针对cTnI这个指标,世界上已经有许多相应的检测产品,这些产品中所用到的抗体大部分都是使用提纯的人cTnI作为免疫抗原免疫动物得到的抗体。至今为止,我国一直没有研制出国产的检测cTnI的试剂盒,在临床上用于检测cTnI的试剂盒都依赖于进口,价格昂贵,给病人带来了较大的负担。由此,本实验室致力于研制自主开发的cTnI检测试剂盒。本工作选取了人cTnI的稳定区段的两个特殊抗原决定簇位点作为操作序列,两者之间由免疫活性极低的5Lys连接,5Lys隔离两个抗原决定簇位点的同时可以降低连接部位的免疫原性。将含有两个特殊抗原决定簇位点的5个重复基因片段接入pET30a、pET28a、pBAD-His表达载体中都没有成功纯化出Antigen抗原多肽。利用BamHI/BgLⅡ两限制性内切酶的同尾酶作用把此基因片段接入pMAL-p2x表达载体内的MBP（麦芽糖结合蛋白,分子量为45kD）之后,共5个重复序列,构成pMAL-Antigen表达载体,通过用1.0mM·L-1的IPTG诱导,结果表达出的MBP-Antigen融合蛋白的大小比理论值小,通过FactorXa蛋白酶切证明了Antigen抗原多肽确实存在着降解问题。经过Amylose-resin亲和层析柱可纯化出纯度达95%以上MBP-Antigen融合蛋白。MBP-Antigen融合蛋白可作为大分子量的免疫抗原,增强了Antigen抗原多肽的免疫原性。将此抗原免疫BABL/C小鼠,取免疫过的小鼠的抗血清,用人cTnI和牛cTnI作为检测抗原,经ELISA法检测其抗体效价及特异性。结果表明,抗体稀释6400倍时,抗体效价约为0.1,抗体效价虽然不是很高,但是存在着对应人cTnI的稳定区段的两个特殊抗原决定簇位点的抗体,为以后的单克隆抗体制备提供了基础。
许敬[3]（2003）在《运动后大鼠血清cTnl及CK、CK-MB、LDH变化的比较研究》文中研究说明大量研究已表明：cTnI是心肌细胞特异性分子标志物。cTnI仅存在于心肌细胞，且在心肌无其他亚型，与骨骼肌肌钙蛋白（sTnI）氨基酸序列约有40％不同源性，N末端有31个额外的氨基酸，使其有独特的心肌抗原性。外周血中cTnI的升高仅来源心肌细胞损伤。在MMD时即可被检出。故其特异性、敏感性优于血清酶学指标。可用于鉴别是骨骼肌损伤还是心肌损伤。血清的酶学CK，CK-MB，LDH等除存在于心肌细胞以外，尚存在于其他多种组织，尤其是骨骼肌细胞。加之测定方法设计方面的不够完美，出现临床上有心肌损伤的“假阳性”，且在有微小心肌损伤时不能被检测出。所以，将酶学检测与cTnI检测联合运用意义更大。目的：本研究通过检测运动后大鼠血清cTnI和CK，CK-MB，LDH及将之进行比较，探讨它们在运动医学中的应用价值。方法：大鼠分为对照组，游泳力竭即刻组，游泳4.5小时后6小时，18小时，24小时组，分别测定其血清cTnI，CK，CK-MB，LDH。cTnI检测用改良Bodor双抗夹心酶联免疫法。CK-MB测定用免疫抑制法。结果：①游泳力竭后即刻组，大负荷运动后6小时，18小时，24小时组cTnI的OD值与对照组相比，差异均无显着性。②游泳力竭后即刻组CK，CK-MB，LDH升高，与对照组相比，P＜0.01，差异有显着性。③大负荷运动后6小时组CK，CK-MB，LDH升高，与对照组相比，P＜0.05，差异有显着性。结论：①游泳力竭后即刻CK，CK-MB，LDH升高，但cTnI未有升高，尚需进一步动态检测cTnI。②大负荷运动后，动态检测未见有血清cTnI升高，提示未有心肌损伤。⑨大负荷运动后6小时组出现的CK，CK-MB，LDH升高是否表明有心肌损伤应重新认识。
王永清[4]（2000）在《心肌钙蛋白Ⅰ的物种同源性》文中提出肌钙蛋白（troponin）由三个亚单位组成:肌钙蛋白I（TnI）与抑制肌动蛋白Mg2+-ATP酶有关,TnC结合于Ca2+并解除TnI抑制,TnT为原肌球蛋白的结合亚单位。Ca2+结合于TnC的调节位点后增强了TnT与TnC的相互作用,同时削弱了TnI对肌动蛋白的抑制。与其他收缩蛋白不同,TnI的心型异构体（isoform）-cTnI仅在心脏组织表达,在胎儿期表达较少,出生后增多,受生长、发育的调控,无论在胎儿、新生儿抑或成年期,其在心房、心室的分布相同:脊椎动物cTnI结构特征是在N末端含有一特异性cAMP依赖的蛋白激酶,与心肌细胞对β-肾上腺能刺激后的反应有关。
二、心肌钙蛋白Ⅰ的物种同源性（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、心肌钙蛋白Ⅰ的物种同源性（论文提纲范文）
（1）先天性室间隔缺损患者GATA4基因突变研究及封堵术后心脏结构和功能变化的随访研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 散发室间隔缺损患者GATA4基因突变研究 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 超声心动图评价室间隔缺损封堵术后心脏结构及功能变化的随访研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述1 GATA4 基因在心脏发育中的作用 |
| 参考文献 |
| 综述2 室间隔缺损介入治疗的现状及进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 中英文对照表 |
| 发表文章情况 |
| 致谢 |
（2）cTnI特殊位点抗原的重复表达、免疫及其抗体效价检测（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 cTnI的特性 |
| 1.2 cTnI作为AMI病人检测的金指标 |
| 1.3 cTnI在血液中的动力学 |
| 1.3.1 心肌损伤后cTnI在血液中存在的形式 |
| 1.3.2 心肌损伤后cTnI在血液中的降解 |
| 1.3.3 cTnI释放入血的量与时间关系 |
| 1.3.4 cTnI与TnC、cTnT的相互作用 |
| 1.4 cTnI的监测方法 |
| 1.5 cTnI抗原位点的发现及配对抗体的发现 |
| 1.6 cTnI监测的标准化 |
| 1.7 抗原的设计 |
| 1.8 牛cTnI与人cTnI的氨基酸序列对比 |
| 1.9 主要研究内容 |
| 第二章 多重复PET30A-ANTIGEN片断质粒的构建及表达 |
| 2.1 pET30a-Antigen质粒构建思路 |
| 2.2 pET30a-Antigen质粒载体构建过程 |
| 2.2.1 AA基因扩增 |
| 2.2.2 NB、BB、BE、EH、HX五段基因的扩增 |
| 2.2.3 pET30a-NB质粒构建及验证 |
| 2.2.4 pET30a-BB质粒构建及验证 |
| 2.2.5 pET30a-BE质粒构建及验证 |
| 2.2.6 pET30a-EH质粒构建及验证 |
| 2.2.7 pET30a-HX质粒构建及验证 |
| 2.3 Antigen多肽的诱导表达及纯化 |
| 2.3.1 pET30a-Antigen在E.coli BL21(DE3)中诱导表达 |
| 2.3.2 pET30a-Antigen在E.coli JM109(DE3)中诱导表达 |
| 2.3.3 6His蛋白标签结构纯化Antigen抗原多肽 |
| 2.4 本章小结: |
| 第三章 ANTIGEN抗原多肽的信号肽诱导表达及其转录验证 |
| 3.1 pET28a-Antigen质粒的构建及诱导表达 |
| 3.1.1 pET28a-Antigen质粒的构建 |
| 3.1.2 pET28a-Antigen质粒的诱导表达 |
| 3.2 Antigen抗原多肽的转录、翻译验证 |
| 3.2.1 pET28a-Antigen-Daao质粒多顺返子结构的构建 |
| 3.2.2 pET28a-Antigen-DAAO质粒多顺返子诱导表达 |
| 3.2.3 6His蛋白标签结构纯化Antigen抗原多肽 |
| 3.3 pBAD-Antigen表达载体的构建及其诱导表达 |
| 3.3.1 pBAD-Antiegen质粒构建的思路 |
| 3.3.2 pBAD-Antiegen质粒构建的过程 |
| 3.3.3 pBAD-Antiegen质粒的诱导表达 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 ANTIGEN抗原多肽的融合表达 |
| 4.1 pMAL-Antigen质粒的构建 |
| 4.1.1 pMAL-Antigen质粒的构建思路 |
| 4.1.2 pMAL-1质粒的构建 |
| 4.1.3 pMAL-2质粒的构建 |
| 4.1.4 pMAL-3质粒的构建 |
| 4.1.5 pMAL-4质粒的构建 |
| 4.1.6 pMAL-5质粒的构建 |
| 4.2 pMAL-M质粒的构建 |
| 4.2.1 pMAL-M质粒的构建 |
| 4.3 pMAL-Antigen质粒的诱导表达 |
| 4.4 pET30a-MBP-Antigen质粒的构建、诱导表达及纯化 |
| 4.4.1 pET30a-Mbp-Antigen质粒的构建 |
| 4.4.2 pET30a-Mbp-Antigen诱导表达 |
| 4.5 MBP-Antigen融合蛋白的纯化 |
| 4.6 本章小结 |
| 第五章 HCTNI特殊位点抗原的免疫及抗体的检测 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 动物免疫 |
| 5.1.3 ELISA法检测抗体效价 |
| 5.2 hcTnI和bcTnI氨基酸序列对比 |
| 5.3 抗体效价测定 |
| 5.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1 实验仪器及主要药品 |
| 附录2 菌种和质粒 |
| 附录3 聚合酶链式反应(PCR) |
| 附录4 琼脂糖DNA凝胶电泳 |
| 附录5 DNA限制性内切酶酶切操作 |
| 附录6 DNA连接反应 |
| 附录7 E.coli感受态细胞的制备及质粒转化 |
| 附录8 菌落PCR鉴定法筛选重组菌株 |
| 附录9 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) |
| 附录10 MBP-Antigen纯化的一系列操作 |
| 附录11 考马斯亮兰法(Bradford法)测定蛋白质浓度 |
| 附录12 蛋白抗原包被的ELISA法溶液配制 |
| 附录13 培养基配方 |
| 附录14 抗生素、诱导剂 |
| 附录15 比色分析法测DAAO酶酶活 |
| 附录16 6His蛋白标签结构纯化蛋白 |
| 附录17 斑点法测DNA浓度 |
| 附录18 构建质粒测序结果 |
| 致谢 |
| 研究成果及发表的学术论文 |
| 作者简介 |
| 附件 |
（3）运动后大鼠血清cTnl及CK、CK-MB、LDH变化的比较研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明表 |
| 第一部分 综述:心肌细胞损伤的特异分子标志物--心肌肌钙蛋白(cTn) |
| 1 cTn在心肌收缩中的作用 |
| 2 cTn的分子生物学及免疫学特征 |
| 2.1 cTn结构、分布和释放动力学 |
| 2.2 cTnI的物种同源性 |
| 2.3 cTnT基因 |
| 3 cTn检测的方法原理及影响因素 |
| 3.1 检测方法和原理 |
| 3.2 cTn检测的影响因素 |
| 4 cTn检测心肌损伤的敏感性和特异性 |
| 4.1 cTnI |
| 4.2 TnT |
| 5 cTn检测的临床应用 |
| 5.1 诊断AMI |
| 5.2 心肌和骨骼肌损伤的鉴别 |
| 5.3 诊断MMD |
| 5.4 缺血性心肌损伤的危险度分级和预后评价 |
| 5.5 监测溶栓疗效，确定心肌再灌注 |
| 5.6 cTnI与冠状动脉狭窄的关系 |
| 5.7 AMI后心功能预测 |
| 5.8 对梗塞范围的判断价值 |
| 5.9 确定围手术期有无AMI |
| 5.10 心肌炎的诊断 |
| 6 ACS的各种诊断手段比较 |
| 6.1 各种诊断手段的优点、局限性 |
| 6.2 血清中心肌标记物的比较与分析 |
| 7 展望 |
| 7.1 NACB关于冠心病时心肌标志物的应用建议 |
| 7.2 心肌标志物应用准则 |
| 7.3 结语 |
| 8 参考文献 |
| 第二部分 实验研究: |
| 引言 |
| 1 对象与方法 |
| 1.1 对象 |
| 1.2 分组 |
| 1.3 方法 |
| 1.4 检测指标 |
| 1.5 数据统计处理 |
| 1.6 cTnI的检测 |
| 1.7 CK，CK-MB，LDH测定 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 对照组与力竭运动后即刻组cTnI |
| 2.2 对照组与大强度运动后各组cTnI |
| 2.3 对照组与力竭运动后即刻组CK，CK-MB，LDH |
| 2.4 对照组与大强度运动后各组CK，CK-MB，LDH |
| 3 讨论 |
| 3.1 酶学的不足 |
| 3.2 cTnI的特异性 |
| 3.3 国内外的研究 |
| 3.4 实验研究 |
| 4 结论 |
| 5 参考文献 |
| 第三部分 致谢 |
| 第四部分 发表论文 |
四、心肌钙蛋白Ⅰ的物种同源性（论文参考文献）
- [1]先天性室间隔缺损患者GATA4基因突变研究及封堵术后心脏结构和功能变化的随访研究[D]. 林源. 南京医科大学, 2010(06)
- [2]cTnI特殊位点抗原的重复表达、免疫及其抗体效价检测[D]. 时丽丽. 北京化工大学, 2008(11)
- [3]运动后大鼠血清cTnl及CK、CK-MB、LDH变化的比较研究[D]. 许敬. 扬州大学, 2003(04)
- [4]心肌钙蛋白Ⅰ的物种同源性[J]. 王永清. 医学综述, 2000(01)